Обследование на ротавирусную инфекцию приказ. Методические рекомендации. Критерии лабораторного подтверждения диагноза

Утверждаю
Заместитель начальника
Главного эпидемиологического
управления Минздрава СССР
Г.Г.ОНИЩЕНКО

РОТАВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ

Основное учреждение-разработчик:

Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов АМН СССР.

Учреждения-соисполнители:

Научно-исследовательский институт эпидемиологии Минздрава СССР;

Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского Минздрава РСФСР;

Научно-производственное объединение "Ростэпидкомплекс";

Всесоюзный научно-исследовательский институт дезинфекции и стерилизации Минздрава СССР.

1. Этиология

Ротавирус человека относится к группе сходных между собой вирусов животных, которая, кроме него, включает вирус диареи телят Небраски (NCDV), вирус эпизоотической диареи молодых мышей (EDJM), вирус обезьян (SA-II), вирус, происходящий из кишечного содержимого овец и крупного рогатого скота (0), а также - возбудители диареи поросят, жеребят, щенят и других животных. Все эти вирусы имеют одинаковые размеры и форму и близки друг к другу в антигенном отношении.

Ротавирусы животных хорошо размножаются в культуре ткани, поэтому были выделены и изучены раньше, чем ротавирус человека. Ротавирусы телят и обезьян, благодаря их антигенной близости к ротавирусу человека, были использованы для установления его этиологической роли при острых гастроэнтеритах и употребляются до настоящего времени в их серологической диагностике и для получения иммунореагентов.

Ротавирус человека был обнаружен при помощи электронной микроскопии в клетках эпителия двенадцатиперстной кишки и в экстрактах фекалий типичных больных, где он нередко содержится в весьма значительных концентрациях (до 10 частиц в 1,0 г фекалий). Вирион ротавируса представляет собой двухкапсидную (т.е. покрытую двухслойным белковым чехлом) сферическую частицу диаметром 70 - 75 нм, содержит рибонуклеиновую кислоту - РНК (11 двухнитевых сегментов), имеет плавучую плотность в хлористом цезии 1,36 г/куб. см с коэффициентом седиментации 500 - 530 S

По имеющимся характеристикам ротавирус человека вместе с перечисленными выше вирусами животных был отнесен к роду Rotavirus семейства Reoviridae. Название "ротавирус" происходит от латинского rota - колесо, которое частица вируса напоминает в электронно-микроскопических препаратах.

По антигенной специфичности, обнаруживаемой с помощью иммуноферментного анализа, ротавирусы разделяются на две подгруппы (обозначаются римскими цифрами - I и II), а по специфичности, выявляемой в реакции нейтрализации, - на 4 (а возможно и более) серотипа (обозначаются арабскими цифрами - 1, 2, 3, 4). Подгрупповая специфичность тех или иных ротавирусов определяется основным белком внутреннего капсида, а их серотипическая специфичность - гликопротеидом внешнего капсида. Недавно обнаружены ротавирусы нового типа (т.н. параротавирусы), которые не имеют группоспецифического антигена.

2. Эпидемиология

Ротавирусная инфекция имеет повсеместное распространение. Сведения о ее выявлении опубликованы в Австралии, Великобритании, ГДР, Канаде, Индии, Испании, США, Франции, Японии и многих других странах. В Советском Союзе заболевания ротавирусным гастроэнтеритом зарегистрированы среди детей и взрослых ряда областей РСФСР, Закавказья, Украины, Прибалтики, Средней Азии и других территорий. Среди детей и взрослых ротавирусная инфекция может проявляться в виде спорадических случаев, локальных групповых заболеваний и массовых вспышек с охватом на обширных территориях различных групп населения. Среди госпитализированных больных острыми кишечными инфекциями удельный вес взрослых с ротавирусным гастроэнтеритом в среднем составляет 10 - 15%, детей - 15 - 27% и более. Данные литературы о выделении ротавируса (антигена) здоровыми детьми и взрослыми весьма противоречивы: от 0 - 0,5 до 42% - у детей и от 0% до 7% и более - у взрослых. Ротавирусная инфекция регистрируется в течение всего года. Однако свыше 70% больных выявляется в холодное время года. В зимне-весеннем периоде регистрируется также большинство вспышек ротавирусной инфекции среди населения, а также групповые заболевания среди новорожденных и недоношенных детей, детей организованных коллективов, престарелых лиц. Выраженных различий в распределении заболевших ротавирусной инфекцией (как детей, так и взрослых) по полу выявить не удалось.

Источником инфекции при ОКИ ротавирусной этиологии являются инфицированные взрослые и дети - больные манифестной формой инфекции или бессимптомно выделяющие ротавирусы с фекалиями. При этом дети первого года жизни часто заражаются от инфицированных ротавирусами матерей, а дети более старшего возраста и взрослые - от детей организованных детских коллективов. Заражение человека от животных не доказано, хотя возможность его не исключается. В настоящее время ротавирусы разных серотипов обнаружены в экскретах почти 50 видов животных и птиц с выраженными признаками диареи и без таковых.

Ротавирусы у больных и лиц без клинических проявлений заболевания внастоящее время обнаружены только в фекалиях. В окружающую среду больные выделяют ротавирусы, начиная с первого дня болезни, при этом у всех больных максимальное количество возбудителя в фекалиях (до 10 - 10 вирусныхчастиц в 1 г) выявлено в течение первых пяти дней болезни, что определяетнаибольшую эпидемиологическую опасность больных для окружающих именно в этот период болезни. В течение последующих 6 - 10 дней выделение ротавирусов с фекалиями больных резко падает по мере нормализации стула. Средняя продолжительность выделения ротавирусов больными составляет 7 - 8 дней, но у отдельных больных этот период может продолжаться до 20 - 30 дней. Лица без клинических проявлений заболевания могут длительно выделять ротавирусы с фекалиями - до нескольких месяцев и более (период наблюдения).

Основной механизм передачи ротавирусов - фекально-оральный, реализуемый водным, пищевым и бытовым путями передачи. При спорадических и локальных групповых заболеваниях инфицирование ротавирусами происходит преимущественно бытовым путем. Этому способствует очень низкая патогенная доза ротавирусов (в пределах 10 вирусных частиц). Установлено, что на различных объектах внешней среды ротавирусы сохраняют жизнеспособность от 10 - 15 дней (в зависимости от температуры и влажности воздуха) до одного месяца; в фекалиях - от нескольких недель до семи месяцев.

В настоящее время в нашей стране и за рубежом регистрируются водные и пищевые вспышки ротавирусной инфекции. Ротавирусы обнаруживаются в воде рек, озер, морей, в подземных водах, водопроводной воде, отдельных пищевых продуктах (молоко и др.).

Возможность реализации в отдельных случаях капельного, пылевого и других путей распространения ротавирусов носит предположительный характер.

Ротавирусы известны также как один из главных этиологических агентов при нозокоминальных (внутрибольничных) вспышках острого гастроэнтерита. В условиях стационаров разного профиля могут инфицироваться до 50 - 60% больных детей. Известны случаи вспышек в родильных домах. Чаще поражаются дети, находящиеся на искусственном вскармливании, страдающие острыми и хроническими заболеваниями, с различными видами иммунодефицита.

Восприимчивость иммунитет. К ротавирусам восприимчивы люди всех возрастных групп. При этом наибольшая восприимчивость отмечается у детей в возрасте от 6 мес. до 2-х лет. Антитела к ротавирусам выявляются у 50 - 60% детей первого года жизни, в возрасте старше 3-х лет - уже более чем у 90% и практически у всех взрослых. Однако, согласно данным литературы, наличие антител в сыворотке крови свидетельствует в основном лишь о встрече организма человека с ротавирусом, а не о наличии иммунитета, так как даже при значительном уровне гуморальных антител возможны повторные заболевания. Иммунитет при ротавирусной инфекции окончательно не изучен. Считается, что резистентность к инфекции обусловлена в основном местной невосприимчивостью клеток эпителия тонкого кишечника, связанной с наличием секреторных антител класса IgA. Указанные антитела содержатся также в молоке кормящей матери и, видимо, служат фактором пассивной иммунизации новорожденных детей, которые при отсутствии клинических проявлений болезни с фекалиями могут выделять значительные количества ротавирусов в окружающую среду и заражать недоношенных детей и детей с неблагоприятным преморбидным фоном. Ротавирусы различных серотипов не создают перекрестного иммунитета, в связи с чем у одного и того же ребенка или взрослого возможны повторные заболевания, обусловленные другими серотипами вируса. Отмечается также нестойкий характер иммунитета у переболевших ротавирусным гастроэнтеритом, повторные заболевания нередко регистрируются через 1 - 1,5 года после перенесенной инфекции.

Особенности эпидемического процесса при ротавирусной инфекции:

Повсеместность территориального распространения;

Выраженная зимняя или зимне-весенняя сезонность;

Низкая заражающая доза возбудителя и высокая очаговость в организованных коллективах;

Поражение лиц всех возрастных групп;

Высокий удельный вес заболевших среди детей до 2-х лет с максимумом выявления заболеваний среди детей второго полугодия жизни;

Высокая активность водного и бытового путей передачи инфекции;

Локальность домашних очагов, ограниченных преимущественно семьей;

Возможность бессимптомного выделения ротавирусов среди детей и взрослых;

Возможность внутрибольничного распространения инфекции при участии медицинского персонала и родителей больных детей.

3. Клиника

Клиническая картина ротавирусной инфекции имеет много общего с клиническими проявлениями острых кишечных заболеваний другой этиологии, что затрудняет диагностику этого заболевания. Однако существует ряд характерных отличий, позволяющих своевременно заподозрить это заболевание и правильно проводить противоэпидемические и лечебные мероприятия.

Инкубационный период короткий и длится от 15 часов до 3 - 5 суток, но чаще всего - 1 - 3 дня.

У большинства больных отмечается острое начало заболевания, когда весь симптомокомплекс развивается в первые сутки болезни. У детей раннего возраста возможно подострое начало, характеризующееся появлением в первые дни болезни 1 или 2-х симптомов и присоединением остальных со 2 - 3 дня болезни. Наиболее патогномоничным для ротавирусной инфекции является поражение желудочно-кишечного тракта, которое у 60 - 70% больных сочетается с развитием симптомов поражения респираторного тракта. Иногда катаральные явления могут предшествовать на 3 - 4 дня дисфункции кишечника. Респираторный синдром характеризуется умеренной гиперемией и зернистостью зева, мягкого неба и небных дужек, заложенностью носа, покашливанием, которые в отличие от ОРВИ менее выражены, не имеют тенденции к нарастанию и кратковременны (4 - 5 дней). Диарея отмечается у 95 - 97% больных. Для ротавирусной инфекции характерно развитие гастроэнтерита, реже энтерита. Стул обычно жидкий, водянистый, пенистый, слабо окрашенный, без примесей или с небольшой примесью слизи. У детей раннего возраста преобладает водянистая диарея, чем и объясняется более частое развитие эксикоза в этой возрастной группе. Частота стула в среднем не превышает 4 - 5 раз в сутки, но может достигать у детей младшего возраста 15 - 20 раз. Длительность диареи у взрослых и детей старшего возраста составляет 3 - 7 дней, у грудных детей нередко продолжается до 10 - 14 дней. Рвота является кардинальным симптомом и отмечается у 80% больных ротавирусной инфекцией. Чаще всего она возникает одновременно с поносом или предшествует ему. Рвота нередко повторная, но кратковременная (1 - 2 дня). Многократная и неукротимая рвота для данной инфекции не характерна и чаще свидетельствует о смешанной инфекции. Температура, как правило, не превышает 38,5 - 39 °C и нормализуется к 3 - 4 дню болезни. Наиболее типичными признаками общей интоксикации являются слабость, вялость, адинамия, головная боль, головокружение. Тяжесть заболевания определяется развитием изотонического эксикоза I - II степени, реже III степени, который чаще встречается у детей грудного возраста. При этом потери электролитов (Na и K) невелики, что надо учитывать при проведении регидратационной терапии.

4. Диагностика и дифференциальная диагностика

При объективном обследовании у больных отмечается вялость, гиперемия конъюнктив и инъекция сосудов склер. Язык умеренно обложен, суховат. Живот мягкий, умеренно болезненный при пальпации в области расположения тонкого кишечника. Печень и селезенка не увеличены. Слепая и сигмовидная кишки мягкие, безболезненные. Артериальное давление снижено. Пульс не учащен, а скорее имеется склонность к относительной брадикардии. Менингеальных явлений нет. В периферической крови в самом начале болезни может иметь место умеренный лейкоцитоз, со 2 - 3 дня болезни имеет место склонность к лейкопении со снижением числа палочкоядерных форм лейкоцитов и ростом числа лимфоцитов и моноцитов, СОЭ не ускорена.

При лабораторном анализе мочи отмечается небольшая альбуминурия, быстро проходящая микрогематурия, небольшое повышение числа лейкоцитов и возможно появление гиалиновых цилиндров. Изменения в моче находятся в соответствии со степенью тяжести течения болезни и обезвоживания.

При микроскопическом исследовании кала число лейкоцитов не превышает 10 - 15 в поле зрения, отмечается примесь слизи.

Ректороманоскопически можно выявить умеренную гиперемию слизистой оболочки прямой и сигмовидной кишок без очаговых изменений.

Ротавирусный гастроэнтерит подразделяют по степени тяжести, которая определяется интенсивностью диареи и обусловленного ею обезвоживания организма, а также выраженностью общей интоксикации. Различают три степени тяжести течения ротавирусного гастроэнтерита: легкая, средне-тяжелая и реже тяжелая.

Дифференциальная диагностика проводится с сальмонеллезом , холерой, дизентерией , пищевыми токсикоинфекциями, вызванными условно патогенными микроорганизмами, персиниозом, другими вирусными гастроэнтеритами.

Для гастроинтестинальной формы сальмонеллеза характерно одновременное заболевание лиц, употреблявших в пищу недоброкачественные продукты. Типично острое начало: гипертермия, сильный озноб, рвота, сильная боль в животе, профузный зловонный стул, сохраняющий каловый характер, нейтрофильный лейкоцитоз со сдвигом лейкоцитарной формулы влево. При сальмонеллезе отсутствуют изменения слизистой оболочки зева, печень обычно увеличена. Выделение возбудителя при бактериологическом исследовании испражнений, рвотных масс или промывных вод желудка решает вопрос о диагнозе.

По многим клиническим признакам массовости и быстроте распространения заболеваний ротавирусный гастроэнтерит может напомнить холеру. Но ротавирусная инфекция отличается более легким течением и в частности тем, что при ней не развивается состояние алгида, а также наличием типичных изменений слизистой оболочки ротоглотки.

Важнейшее значение приобретают результаты бактериологического исследования в случае обнаружения холерных вибрионов. Аналогичное положение имеет место и при НАГ-инфекции.

Бактериальная дизентерия отличается острой болью в животе, частыми, иногда ложными, позывами, стулом с примесью слизи и крови, выраженным сигмоидитом, постоянной лихорадочной реакцией, патологическими изменениями в дистальном отрезке толстой кишки по данным ректоскопии. Все эти признаки, а также результаты бактериологического исследования позволяют сравнительно легко провести дифференциальную диагностику при колитической форме дизентерии. При гастроэнтерической форме дизентерии значение результатов бактериологического исследования резко возрастает.

Дифференциальная диагностика ротавирусного гастроэнтерита и пищевых токсикоинфекций, вызываемых условно патогенными возбудителями, особенно сложна, если учесть недостаточную изученность клинической картины этих заболеваний. По диагностической значимости из лабораторных исследований следует отдавать предпочтение положительным результатам вирусологических и иммунологических исследований, подтверждающих ротавирусную природу заболевания, а не обнаружению условно патогенных бактерий в испражнениях больного.

Для гастроинтестинальной формы персиниоза характерно более постепенное начало, наличие, наряду с гастроэнтеритом, болей в мышцах, суставах; печень, как правило, увеличена; стул вязкий из-за значительной примеси слизи, а иногда возможна примесь крови. В крови отмечается лейкоцитоз; СОЭ повышена.

Синдром гастроэнтерита может занимать видное место при некоторых вирусных заболеваниях. К их числу относится аденовирусная инфекция, для которой, помимо поражения кишечника, характерным является конъюнктивит , ринит, фарингит, тонзиллит , бронхит, пневмония , увеличение шейных лимфатических узлов, печени, селезенки, длительная лихорадка.

От энтеритов и гастроэнтеритов, вызванных энтеровирусами Коксаки и ЕСНО, ротавирусный гастроэнтерит отличается моносиндромной клинической картиной, в которой ведущее место занимает поражение кишечника. В противоположность этому при эпидемических вспышках энтеровирусной природы отмечается наличие различных клинических форм болезни, "многоформность" клинической картины, в которой существенное место могут занимать симптомы поражения оболочек головного мозга, кожи, верхних дыхательных путей.

Дифференциальная диагностика ротавирусной инфекции с эшерихиозами у детей наиболее трудна и может основываться на следующих критериях:

Большая острота начала ротавирусной инфекции по сравнению с эшерихиозами, особенно обусловленных энтеропатогенными эшерихиями;

Более быстрое выздоровление при ротавирусной инфекции, даже у детей раннего возраста;

Большая частота респираторного синдрома при ротавирусной инфекции, но его меньшая выраженность и продолжительность.

Наибольшие сложности представляет диагностика смешанных ротавируснобактериальных инфекций, удельный вес которых в зимние сезоны года довольно велик (7 - 10% от всех ОКИ).

Особенностью клиники смешанных инфекций является наличие симптомокомплексов, свойственных обеим сочетающимся инфекциям: нарастание симптомов интоксикации, появление признаков воспалительных изменений слизистой тонкой и толстой кишки, замедление сроков выздоровления.

5. Лечение

Госпитализация детей и взрослых с подозрением на ОКИ, вызванные ротавирусами, проводится по клиническим (тяжесть заболевания) и эпидемиологическим показаниям (наличие в окружении заболевшего ослабленных детей, детей первого года жизни, посещающих дошкольные детские учреждения, работников пищевых предприятий и лиц, приравненных к ним, невозможность соблюдения противоэпидемического режима на дому и др.). Дети в возрасте до года с выраженной симптоматикой ОКИ госпитализируются в первую очередь. Обязательна раздельная госпитализация больных с подозрением на ротавирусный гастроэнтерит и ОКИ иной этиологии (отдельные палаты, боксы). Необходимо соблюдать принцип "одномоментного заполнения" палат (боксов).

Лечение больных с ротавирусным гастроэнтеритом, с учетом существующих представлений о патогенезе этого заболевания, включает в себя щадящий режим и компенсацию нарушений функционального состояния кишечника, восстановление гидроэлектролитного баланса и детоксикации организма.

На время острого периода болезни назначается диета 4-Б, при которой имеет место резкое ограничение углеводов (до 200 г) и увеличение количества белка (до 150 г) с некоторым снижением калорийности (2400 кал.). Ограничивается количество сахара до 40 г в день, овощей и фруктов. Исключается молоко. Соль не ограничивается.

Показано назначение таких пищеварительных полиферментных препаратов отечественного производства как ораза, солизим, сомилаза, которые в терапии больных ротавирусным гастроэнтеритом не уступают импортным (панзинорм, дигестал, фестал, трифермент и прочие).

Обязательно оценивается степень дегидратации организма и проводится терапия, направленная на восполнение избыточных потерь воды и солей. При обезвоживании I - II степени по В.И. Покровскому назначаются глюкозо-электролитные растворы орально (регидрон глюкосолан) с учетом потерь жидкостей и электролитов, а при обезвоживании III степени необходимо начинать лечение с внутривенного введения водно-солевых растворов (трисоль, квартесоль, хлосоль, ацесоль) и др.

Тактика введения растворов проводится в соответствии с принципами регидратационной терапии.

С целью стабилизации нормальных показателей кровообращения и дезинтоксикации можно вводить коллоидные растворы (гемодез, полиглюкин, реополиглюкин).

Необходимо подчеркнуть, что назначение антибактериальных препаратов, если нет сопутствующей бактериальной инфекции, не обосновано.

Целесообразно применение адсорбирующих и вяжущих препаратов.

Лечение вирусоносительства в настоящее время не разработано.

Выписка реконвалесцентов проводится после стабильной (в течение 2 - 3 дней) нормализации стула и исчезновения всех других клинических симптомов основного заболевания при отсутствии осложнений.

Детям, посещающим дошкольные учреждения, работникам пищевых объектов и лицам, к ним приравненных, проводится однократное вирусологическое обследование по исчезновении клинических симптомов.

Остальные контингенты больных не подлежат обязательному лабораторному обследованию.

6. Лабораторная диагностика

Лабораторная диагностика ротавирусного гастроэнтерита в настоящее время не представляет трудности. Быстрое развитие клинического синдрома и краткосрочное пребывание больного в стационаре диктуют необходимость применения экспресс-методов установления этиологии заболевания. Большинство методов лабораторной диагностики, рекомендуемых в настоящем руководстве, позволяют выявить ротавирусы в течение первых суток. Выбор метода в каждом случае определяется технической оснащенностью лаборатории, а также наличием соответствующих реагентов.

Традиционные методы обнаружения серологических сдвигов в сыворотках больных (реакция нейтрализации, торможения гемагглютинации и связывания комплемента) имеют значение при ретроспективном анализе заболевания. Поэтому для ранней серологической диагностики ротавирусной инфекции рекомендуется определение антител класса IgM .

Объектом вирусологического исследования больного человека служат обычно фекалии. Наличие и распространение ротавирусов в окружающей среде выявляются путем исследования образцов почвы, пищевых продуктов и воды (сточные воды, вода естественных и искусственных водоемов, питьевая вода).

6.1. Обнаружение ротавирусов в клиническом материале

и в образцах окружающей среды

6.1.1. Подготовка образцов для исследования; отбор проб

При отборе проб для вирусологического исследования соблюдают некоторые общие требования, принимая меры предохранения материала от контаминации. Пробы отбирают только в стерильную посуду с плотной резиновой пробкой, укрепленной лейкопластырем. Транспортируют пробы в контейнерах со льдом или хладоагентом.

6.1.2. Приготовление суспензий, осветление,

очистка образцов, удаление бактериальной флоры

Подготовка образцов фекалий к исследованию на ротавирус включает приготовление 10% суспензии, гомогенизацию, центрифугирование при 3000 об./мин. в течение 30 минут для удаления бактериальной флоры. При обследовании объектов внешней среды и пищевых продуктов проводят предварительное концентрирование исследуемого материала.

6.1.3. Концентрирование вирусных частиц в образцах воды

Концентрирование ротавирусов - важное условие повышения эффективности их обнаружения в водных объектах окружающей среды.

Метод концентрирования ротавирусов с помощью адсорбционной хроматографии на пористом кремнеземе - макропористом стекле (МПС) - прост и удобен, при использовании объемов воды от 0,1 до 10 л. При пропускании образца через слой МПС, вирус сорбируется на поверхности стекла. Для элюции вируса используют растворы, обладающие способностью вызывать десорбцию вируса. Вирус снимается со стекла небольшим объемом раствора, что приводит к концентрированию в десятки - сотни раз по сравнению с исходной пробой.

Для повышения адсорбционных свойств отечественные препараты стекла марки МПС-1000 ВГХ обрабатывают следующим образом: готовят смесь (1:1) 3% H O и 6 М HCl. Стекло заливают приготовленной смесью из расчета 1 объем стекла на 2 объема смеси. Кипятят в вытяжном шкафу (без пробки) в течение 1 часа, соблюдая меры предосторожности. Отмывают до нейтрального pH дистиллированной водой. Высушивают при температуре 100 °C.

Стеклянную колонку, предварительно обработанную силиконовой жидкостью, заполняют стеклом (2 - 3 куб. см), замоченным в дистиллированной воде. К исследуемой пробе (3 л) добавляют 1 М раствор MgCl до конечной концентрации 0,05 М. Воду пропускают через колонку со скоростью 150 - 500 мл/час, регулируя скорость протекания с помощью зажимов. Пропускают через колонку 10 мл элюирующего раствора: мясной экстракт 3%, pH 9,0; или триптозофосфатный бульон 1%, pH 9,0; или трис HCl 0,1 М, содержащий 2 М NaCl, pH 11,0 (растворы перечислены в порядке снижения их элюирующих свойств). Сорбируют фракции объемом 1 мл, pH во фракциях доводят до нейтрального значения.

6.2. Обнаружение вирусных частиц с помощью электронной микроскопии (ЭМ) и иммуноэлектронной микроскопии (ИЭМ)

Так как в первые 2 - 3 дня болезни содержание частиц ротавируса в фекалиях типичных больных обычно велико, то для выявления ротавируса достаточно широко применяется метод ЭМ, с помощью которого можно обнаружить ротавирусные частицы без дополнительного концентрирования фекальной суспензии.

Для приготовления препаратов каплю исследуемой 10% суспензии наносят на пластинку зубного воска или парафинированную бумагу. На каплю пленкой-подложкой вниз накладывают предметную электронно-микроскопическую сетку. Спустя 1 - 3 мин. сетку промывают на капле дистиллированной воды и контрастирующего раствора (2% раствор фосфорновольфрамовой кислоты, доведенной до pH 6,5 - 6,6 с помощью 1 NKOH), избыток которого через 30 - 40 сек. удаляют фильтровальной бумагой и сетку высушивают. Просмотр препаратов проводят в электронном микроскопе при инструментальном увеличении 30 - 50000x.

Ротавирусы достаточно легко выявляются при ЭМ исследовании фекальных суспензий по характерным размерам и морфологии вирусных частиц. Ротавирусы следует дифференцировать от различных вирусных частиц и вирусоподобных образований, частиц бактериофагов и бактериальных жгутиков, встречающихся в фекальном материале.

Применение техники ИЭМ дает возможность в ряде случаев не только повысить процент обнаружения ротавирусов, но и доказать их этиологическую роль. Для исследования методом ИЭМ 0,1 мл разведенной 1:5 иммунной сыворотки животных смешивают с 0,4 мл 10% экстракта фекалий. Смесь инкубируют в течение 1 часа при комнатной температуре, а затем в течение 12 часов при 4 °C, после чего центрифугируют в течение 90 мин. при 15000 об./мин. Надосадочную жидкость сливают, а полученный осадок ресуспендируют в нескольких каплях дистиллированной воды, контрастируют 2% раствором фосфорновольфрамовой кислоты (pH 6,5) и помещают на предметные сетки; избыток влаги удаляют фильтровальной бумагой. Изучение препаратов проводят в электронном микроскопе при инструментальном увеличении 50000x, просматривая не менее пяти ячеек предметной сетки. В случае положительного результата ротавирусные частицы выявляются в препаратах в виде специфических скоплений (иммунных комплексов).

6.3. Выявление антигена ротавируса в исследуемом материале

6.3.1. Получение иммунореагентов

Гипериммунные сыворотки и специфические иммуноглобулины к ротавирусу получают путем иммунизации кроликов, морских свинок, кур.

Антиген для иммунизации получают следующим образом: 5 мл культуральной суспензии ротавируса SA-II обрабатывают трипсином, вносят в матрацные колбы емкостью 1,5 литра с монослоем гетероплоидных клеток почки зеленой обезьяны 4647, инкубируют в течение 60 минут при 37 °C; добавляют бессывороточную поддерживающую среду и выдерживают в течение 24 - 48 часов при 37 °C. Всю биомассу подвергают 3-кратному замораживанию или обработке ультразвуком, добавляют ПЭГ М 6000 до 8 - 10% концентрации, оставляют 20 часов при 4 °C, затем центрифугируют при 10000 об./мин. 2 часа. Осадок ресуспендируют в ФСБ (1/30 - 1/50 от объема биомассы). После очистки фреоном 113, водную фазу используют для иммунизации животных и в качестве антигена при иммунологических исследованиях. Концентрат в объеме 1 мл содержит не менее 10 вирусных частиц.

Иммунизация кроликов: кроликам вводят внутривенно по 2 мл препарата ротавируса в 1, 7, 35, 42 дни, забор крови на 49 день после начала иммунизации. В 1 и 35 дни вводят антиген дополнительно с полным адъювантом Фрейнда в несколько точек спины.

Фракцию иммуноглобулинов осаждают из гипериммунной сыворотки кролика 10% водным раствором полиэтиленгликоля (ПЭГ) с молекулярной массой 6000. Осадок собирают центрифугированием, растворяют и диализуют против 0,01 М К-фосфатного буфера (pH - 7,4) с 0:01 М Nace (ФСБ). Концентрацию иммуноглобулинов определяют спектрофотометрически.

Иммунизация морских свинок: животным вводят внутримышечно 0,5 мл концентрированного препарата ротавируса с равным объемом полного адъюванта Фрейнда в 1,14 и 28-ой день, забор крови через две недели после последней иммунизации.

Иммунизация кур: 20-недельных кур несушек гибридов породы белый лекгорн "Заря-17" иммунизируют внутривенно в 1, 14, 28 дни. При первой иммунизации антиген вводят дополнительно внутримышечно в смеси с равным объемом полного адъюванта Фрейнда. Максимальное количество антител в желтке наблюдают после третьей иммунизации. Куры могут быть использованы перманентно после реиммунизации.

Выделение иммуноглобулинов кур: желток отделяют от белка в скорлупе или воронке Бюхнера и отмывают водопроводной водой. Желток (10 мл) переносят в центрифужную пробирку, добавляют двойной объем (20 мл) ФСБ и тщательно перемешивают. Вносят ПЭГ 6000 до концентрации 3,5% (вес/объем) и перемешивают 10 мин. при 14000 g. Надосадочную жидкость фильтруют через бумажный фильтр в мерный цилиндр. Вносят дополнительно ПЭГ 6000 до конечной концентрации 12% и перемешивают. Выпавшие в осадок иммуноглобулины собирают центрифугированием (10 мин. 14000). Осадок растворяют в 5 мл ФСБ (1/2 объема желтка). Концентрация белка в препарате обычно составляет 6 - 12 мг/мл.

6.3.2. Метод иммуноферментного анализа (ИФА)

Метод иммуноферментного анализа (ИФА), основанный на применении антител, меченных молекулой фермента (пероксидазой), является одним из наиболее распространенных и эффективных и специфических методов детекции вирусного антигена. Обычно используют прямой и непрямой "сэндвич" - варианты. Фермент-маркер выявляют в цветной реакции с субстратом. Прямой вариант ИФА быстрее, чем непрямой, однако он менее чувствителен и специфичен. При постановке непрямого варианта используют антивидовой коммерческий конъюгат иммуноглобулинов с ферментом; для предотвращения неспецифического взаимодействия между конъюгатом и сорбированными на панели антителами необходимо иметь антивирусные сыворотки двух различных видов животных.

Непрямой вариант ИФА: в лунки вносят по 0,1 мл антиротавирусные иммуноглобулины из желтка яиц иммунизированных кур в половину (48) лунок. В другую половину вносят в качестве отрицательного контроля иммуноглобулины из яиц, снесенных до иммунизации. Сорбцию иммуноглобулинов проводят из раствора с концентрацией 5 мкг/мл в ФСБ в течение ночи при 4 °C. Содержимое лунок сливают, лунки промывают ФСБ-Т и вносят по 0,1 мл исследуемого образца в ФСБ-Т с 1% БСА и 0,01 М ЭДТА в лунки с антиротавирусными и нормальными иммуноглобулинами и инкубируют 1 час при 37 °C.

После отмывания в лунки вносят по 0,1 мл антиротавирусной сыворотки кролика, разведенной до 1:1000 - 1:25000 в буфере ФСБ-Т. Оптимальное разведение сыворотки определяют в предварительно поставленных опытах. Панели закрывают и инкубируют 2 часа при 37 °C. Лунки промывают и вносят по 0,1 мл коммерческого препарата меченных пероксидазой антител против IgG кролика в концентрации 1 - 2,5 мкг/мл по содержанию пероксидазы в ФСББ-Т-БСА и инкубируют 1 час при 37 °C. Лунки промывают, вносят по 0,1 мл свежеприготовленной субстратной смеси (О-фенилен-диамин 0,5 мг/мл в 0,05 М Na-цитратном буфере pH 5,0; H O - 0,03%. (Внимание! Работа требует осторожности!)) и инкубируют при комнатной температуре в темноте в течение 30 - 40 мин. Ферментативную реакцию останавливают добавлением 0,05 мл 3 М H SO . Результаты реакции учитывают визуально или спектрофотометрически. Положительными считают пробы, оптическая плотность которых не менее, чем в 2 раза превышает оптическую плотность отрицательного контроля.

6.3.3. Метод коагглютинации

Этот метод основан на способности белка A золотистого стафилококка штамма Cowan соединяться с Fc - фрагментом IgG, и при образовании специфического комплекса антиген-антитело вызывать феномен агглютинации.

Для постановки реакции коагглютинации используют коммерческий сухой стафилококковый реагент, содержащий белок A (НИИЭМ им. Пастера, Ленинград), который регидратируют перед использованием в 0,1% растворе метиленового синего.

Предварительно, каждую серию гипериммунной сыворотки проверяют на наличие антистафилококковых антител. Для этого на предметном стекле смешивают равные объемы сыворотки в разведении 1:500 и 10% суспензию стафилококка. Учитывают результаты в течение 5 минут по образованию агглютината. Для работы отбирают сыворотки, которые не содержат антистафилококковых антител в разведении 1:500. Для приготовления диагностикума 0,01 мл антиротавирусной сыворотки, разведенной 1:10 ФСБ смешивают с 0,5 мл 10% взвеси стафилококка, выдерживают при комнатной температуре в течение 1 часа, затем добавляют 9,5 мл ФСБ (диагностикум). Таким же образом сенсибилизируют стафилококк преиммунной сывороткой (контрольный реагент). Диагностикум и контрольный реагент используют в реакции РКА и ТРКА.

Для постановки РКА в u-образные лунки панели вносят 0,05 мл ФСБ pH-7,4; в две лунки вносят микротитратором Такаччи или дозатором 0,05 мл 10% суспензии фекалий и готовят серийные двухкратные разведения 1:2 - 1:256. В лунки первого ряда добавляют по 0,05 мл диагностикума, а в лунки второго ряда по 0,05 мл контрольного реагента. Панели накрывают крышкой и инкубируют в термостате при 37 °C - 3 часа. В каждом опыте испытываются ранее установленные путем электронной микроскопии положительная и отрицательная на ротавирус проба суспензии фекалий, а также лизаты клеток инфицированных ротавирусом SA-II.

Учет реакции: положительными считают результаты, когда в ряду с диагностикумом выявляется агглютинационный "зонтик", при отрицательном результате или снижении титра в 4 раза в параллельном ряду с контрольным реагентом. Отрицательными считают результаты, когда в обоих параллельных рядах образуются диски. В целях устранения неспецифической коагглютинации в парных рядах суспензию фекалий адсорбируют с равным объемом нормальной сыворотки кролика при 37 °C в течение 2-х часов, с последующим прогреванием при 80 °C в течение 45 минут. Затем повторно испытывают в реакции коагглютинации.

6.3.4. Метод твердофазной реакции коагглютинации (ТРКА)

Данный метод выявления ротавирусных антигенов базируется на принципах твердофазного иммуноферментного метода (см. 4.3.2). Однако в отличие от последнего в ТРКА в качестве метки используется не фермент, а диагностикум и контрольный реагент (см. 4.3.3).

Для постановки ТРКА используют иммунологические панели с u-образным дном лунок. Для сенсибилизации в лунки вносят по 0,1 мл гипериммунной сыворотки, разведенной 0,01 М карбонатно-бикарбонатным буфером (pH 9,6) 1:1000. Панели с сыворотками оставляют на 2 - 3 часа при 37 °C. Несвязавшиеся с твердой фазой антитела удаляют трехкратным отмыванием по 3 мин. ФСБТ. После этого в лунки вносят по 0,05 мл исследуемых, а также заведомо положительных и отрицательных проб (по 2 лунки для каждой пробы) и оставляют на 2 часа при 37 °C для образования комплексов антиген-антитело. Несвязавшийся антиген и сопутствующие примеси удаляют трехкратным отмыванием ФСБТ. Затем в одну лунку добавляют 0,05 мл 0,5% стафилококкового диагностикума, во вторую (контрольную) 0,05 мл 0,5% взвеси стафилококка, сенсибилизированного преиммунной сывороткой (см. 4.4.3). Инкубацию проводят либо в течение 1 - 2 часов при 37 °C с последующим помещением на 1 - 3 часа при 4 °C, либо в течение 18 - 24 часов при 4 °C. Результат реакции агглютинации учитывают визуально: при положительной реакции - агглютинированные бактерии образуют "зонтик"; при отрицательной реакции - бактерии полностью оседают в виде диска.

6.3.5. Метод непрямой гемагглютинации

При этом методе выявление антигена ротавируса основано на использовании антительного эритроцитарного диагностикума, представляющего собой эритроциты барана, сенсибилизированные иммуноглобулином асцитной жидкости белых крыс, иммунизированных ротавирусом SA-II.

Двухкратные разведения 10% фекальной суспензии в лунках панели испытывают с эритроцитарным диагностикумом. Агглютинация эритроцитов диагностикума свидетельствует о наличии антигена ротавируса в пробе. Подробное описание методики постановки РНГА изложено в инструкции, прилагаемой к комплекту препарата (Научно-производственное объединение "Ростэпидкомплекс" г. Ростов-на-Дону).

Комплект "Ротатест" основан на обратной пассивной гемагглютинации и предназначен для выявления ротавируса в faeces и для определения антител против ротавируса в сыворотках крови.

6.3.6. Метод иммуноцитохимической детекции ротавируса

Метод основан на иммунохимическом определении вирусного антигена синтезирующегося в клетках в результате их заражения вирус-содержащим материалом.

Преимущество метода по сравнению с ИФА заключается в более высокой чувствительности, а также возможности определить и количественно оценить инфекционность исследуемой пробы.

Постановка опыта: перевиваемые клетки почки зеленой обезьяны в концентрации 3 - 10 кл/мл вносят по 0,2 мл в лунки плоскодонных панелей и инкубируют при 37 °C (24 - 48 час.). Затем клетки промывают средой Игла-МЕМ. Тестируемый материал разводят в среде Игла-МЕМ, активируют в течение 1 часа при 37 °C в присутствии 10 мкг/мл трипсина и вносят по 0,1 мл не менее чем в 4 лунки. Положительным контролем служат лунки, в которые внесен материал, заведомо содержащий ротавирус. Отрицательные контроли: лунки с незараженными клетками и лунки, в которые внесен материал, аналогичный исследуемому, но заведомо не содержащий ротавирусов. Адсорбцию проводят в течение 1 часа при 37 °C, затем среду удаляют, клетки промывают средой Игла-МЕМ. В лунки вносят по 0,2 мл среды Игла-МЕМ с 1 мкг/мл трипсина и инкубируют 48 часов при 37 °C.

Клетки дважды промывают физиологическим раствором и фиксируют охлажденным (-20°) 85% ацетоном, выдерживают 2 часа при -20°, затем ацетон удаляют. Панель отмывают 3 раза ФСБ, содержащим 0,05% Твина 20 (ФСБ-Т). В лунки вносят по 0,1 мл разведенной 1:1000 в ФСБ-Т иммунной антиротавирусной сыворотки кролика. Инкубируют 2 часа при 37 °C. После отмывания панели в лунки вносят по 0,1 мл препарата меченных пероксидазой антител против IgG-кролика (коммерческий препарат), в концентрации 2 мкг/мл по содержанию пероксидазы в ФСБ-Т с 1% БСА и инкубируют 1,5 часа при 37 °C.

Панель отмывают 2 раза ФСБ-Т и 1 раз 0,05 М ацетатным буфером, pH 5,0. В лунки вносят по 0,1 мл свежеприготовленного раствора субстрата пероксидазы, содержащего на 10 мл ацетатного буфера/4 мг 3-амино-9-этилкарбазола (АЭК), растворенного в 0,5 мл ацетона, и 0,01 мл 33% перекиси водорода (Внимание! Работа с АЭК требует осторожности). Инкубируют 30 - 40 мин. в темноте при комнатной температуре. Реакцию останавливают, отмывая панель дистиллированной водой.

Учет реакции проводят под световым микроскопом с малым увеличением. Лунки с отрицательными контролями не должны содержать окрашенных клеток. Локальные скопления окрашенных клеток представляют собой фокусы вирусной инфекции.

6.3.7. Метод иммунофлюоресценции

Для выявления антигена ротавируса методом иммунофлюоресценции используют линию клеток 4647. Клетки выращивают на покровных или предметных стеклах, вложенных в пенициллиновые флаконы или пробирки. Инфицированную культуру инкубируют при 37 °C в течение 24 - 48 часов, после чего стекла извлекают из флаконов, промывают в 0,15 М физиологическом растворе с добавлением фосфатного буфера при pH 7,2, споласкивают дистиллированной водой и подсушивают на воздухе. Затем препараты фиксируют в двух сменах (по 10 мин. в каждой) химически чистого охлажденного до 4 °C ацетона.

Препараты обрабатывают по непрямому методу во влажной камере. На клетки культуры наносят по одной капле иммунной ротавирусной сыворотки кролика и выдерживают 30 мин. при 37 °C, затем препараты отмывают трехкратно в ФСБ и удаляют избыток влаги. Влажные препараты окрашивают смесью равных объемов антивидового ФИТЦ-конъюгата и бычьего альбумина, меченного родамином, и инкубируют в течение 30 мин. при 37 °C. После 3-кратной промывки в ФСБ препараты высушивают на воздухе. В целях устранения неспецифической флюоресценции антивирусную сыворотку перед употреблением адсорбируют гомогенатом нормальной клеточной культуры, а ФИТЦ - конъюгат обрабатывают активированным углем по общепринятым методикам.

В качестве обязательных контролей используют: обработанные аналогичным способом препараты незараженных культур и препараты зараженных культур, обработанные на первом этапе нормальной, а также гетерологичной антивирусной сывороткой той же видовой принадлежности, что и иммунная сыворотка к ротавирусу.

В случае положительных результатов в цитоплазме клеток наблюдают отчетливую ярко-зеленую флюоресценцию.

6.4. Метод электрофоретипирования ротавирусов

Метод основан на идентификации ротавирусов с помощью электрофореза в полиакриламидном геле вирусных геномных РНК-сегментов. Метод позволяет дифференцировать штаммы ротавирусов на основании различий в электрофоретической подвижности индивидуальных РНК-сегментов различных изолятов, в связи с чем широко применяется в эпидемиологических исследованиях. Метод не требует предварительного культивирования изолятов, обладает высокой чувствительностью и абсолютной специфичностью.

Метод представляет особый интерес для врачей-эпидемиологов при расследовании групповых заболеваний вспышек ротавирусной инфекции.

Может быть осуществлен на базе лабораторий, оснащенных аппаратами для электрофореза.

Для проведения анализа достаточно 0,2 - 0,5 мл 10 - 20% суспензии фекалий. Суспензии обрабатывают фреоном 113 и инкубируют с проназой (0,2 мг/мл, 15 мин.) в присутствии додецил-сульфата натрия (1%) и этилендиаминтетраацетата натрия (0,001 М). После добавления ацетата натрия (0,3 М) РНК депротеинизируют смесью фенол: хлороформ-изоамиловый спирт и осаждают 2,5 объемами этанола (18 ч при -20 °C или 2 ч при -70 °C). Осадок собирают центрифугированием, растворяют в воде и добавляют диссоциирующий буфер. Электрофорез проводят по метолу Лэммли в пластинах 10% геля. Для окрашивания РНК в геле обычно используют нитрат серебра (0,011 М). После процедуры проявления в геле видны 11 полос РНК, соответствующих геномным сегментом ротавируса.

6.5. Определение иммуноглобулина класса М в сыворотке

больного при ротавирусной инфекции методом твердофазной

реакции коагглютинации (ТРКА)

При этом используется принцип твердофазной реакции коагглютинации (см. 4.3.4) в модификации: для сенсибилизации лунок панели используют 0,1 мл коммерческой бараньей моноспецифической сыворотки против IgM человека, в разведении 1:1000. Панели инкубируют 2 - 4 часа при 37 °C. Затем лунки промывают ФСБТ, заполняют 3% раствором желатина и оставляют на 30 минут при 37 °C. Лунки отмывают ФСБТ и вносят по 0,05 мл исследуемых, а также заведомо положительных и отрицательных сывороток, разведенных 1:100 ФСБТ (по 2 лунки для каждой сыворотки). При определении титра антител исследуют двухкратные разведения тестируемых образцов (1:10 - 1:1280). Панели инкубируют 2 часа при 37 °C и после отмывания в парные лунки вносят по 0,05 мл диагностикума и контрольного реагента. Реакцию учитывают через 1 - 2 часа (см. выше 4.3.4).

Этот же принцип, модифицированный ТРКА, используют для тестирования IgA и IgG антител при ротавирусной инфекции, а также при анализе молозива и молока на лактроглобулины.

Используется метод определения иммуноглобулина класса М в сыворотке больного как для ранней диагностики манифестных форм, так и дифференциальной диагностики их с бессимптомными формами ротавирусной инфекции.

7. Противоэпидемические мероприятия

Каждый случай заболевания острой кишечной инфекцией, вызванной ротавирусами, в первую очередь детей первого года жизни, а также детей, посещающих дошкольные детские учреждения, нуждается в тщательном эпидемиологическом анализе для выявления источника, основных путей и факторов передачи инфекции с целью своевременного проведения, комплекса противоэпидемических мероприятий в очаге.

Мероприятия, направленные на выявление и обезвреживание источника инфекции. Выявление больных, подозрительных на заболевание, проводится врачами всех учреждений здравоохранения: во время амбулаторных приемов, посещений на дому, медицинских осмотров детей в детских учреждениях, стационарах и др. Выявленные больные изолируются из детских коллективов. Медицинское наблюдение и лечение больных могут проводиться в домашних условиях или в стационаре. Дети, посещающие детские учреждения, выписанные из больницы или закончившие лечение на дому с отрицательными результатами лабораторного обследования, допускаются в детские коллективы на основании справки врача-педиатра. Дети, переболевшие РГ и продолжающие выделять ротавирусы (или ротавирусный антиген) с фекалиями без клинических проявлений инфекции, могут быть допущены в детские сады и садиковые группы детских яслей-садов при условии организации постоянного медицинского наблюдения за ними и повторного лабораторного обследования на 2 - 3 неделе от начала заболевания или выделения вируса.

Эпидемиологическое обследование семейных очагов больных РГ проводится при заболевании детей в возрасте до 2-х лет и взрослых из числа декретированных контингентов. В детское учреждение врач-эпидемиолог выходит с обследованием при появлении повторных случаев небактериального гастроэнтерита.

Медицинское наблюдение за детьми, общавшимися с больными, проводится в течение пяти дней со дня изоляции последнего заболевшего.

Лабораторное обследование на ротавирусы (антиген) детей и взрослых, общавшихся с больными, как в семье, так и в организованных коллективах, проводится по указанию инфекциониста и эпидемиолога при наличии показаний (возникновение в семье или в детском коллективе повторных заболеваний ОКИ с аналогичной клиникой), грубое нарушение санитарно-гигиенического режима, наличие в очаге работников пищевых предприятий и лиц, к ним приравненных и др.). Обязательному лабораторному обследованию подлежит мать заболевшего ребенка первого года жизни. Лица, у которых в фекалиях обнаружены ротавирусы (антиген), подлежат тщательному клиническому осмотру инфекционистом. При этом при отсутствии клинических проявлений заболевания дети и сотрудники из коллектива не изолируются.

Работники пищевых предприятий, службы водоснабжения и т.п. на время повторного лабораторного обследования и медицинского наблюдения трудоустраиваются в пределах данного объекта. Повторное лабораторное обследование лиц, экскретирующих ротавирусы (антиген) с фекалиями, проводится по назначению инфекциониста и эпидемиолога с интервалом в 5 - 7 дней, используя комплексное лабораторное обследование.

При возникновении в детских учреждениях групповых заболеваний проводятся карантинные мероприятия в течение 5 дней с момента изоляции последнего больного.

В учреждениях регулярно проводится санитарно-просветительная работа, направленная на профилактику ротавирусной инфекции.

Мероприятия, направленные на разрыв механизма передачи инфекции.

Проведенными исследованиями установлено разрушающее действие на ротавирусы температуры в +70 °C через 15 минут; при воздействии ультрафиолетового облучения ротавирусы инактивируются также через 15 мин.

По своей устойчивости к действию широко применяемых дезинфицирующих средств, ротавирусы близки к энтеровирусам и вирусу гепатита A. В связи с чем в очагах ротавирусной инфекции и в стационарах, где находятся больные, дезинфекционные мероприятия целесообразно проводить по режимам и с использованием средств, рекомендуемых при вирусном гепатите A и энтеровирусных инфекциях (приложение N 4 к Приказу МЗ СССР N 752 от 08.07.81 и Приказ МЗ СССР N 916 от 04.08.83). Особое внимание необходимо уделять правильной обработке рук лиц, обслуживающих детей, а также сосок, игрушек, посуды и других предметов ухода за больным.

Рекомендуется проводить регулярное ультрафиолетовое облучение. Ультрафиолетовое облучение обычно проводится с помощью облучателей - ОБН-150 на 30 куб. м помещения, ОБП-300 на 60 куб. м помещения и другими. Неэкранированные облучатели устанавливают из расчета 1 - 1,5 вт на 1 куб. м помещения при отсутствии людей (во избежание поражения слизистых глаз), экранированные - из расчета 2 - 2,5 вт на 1 куб. м, облучение можно проводить в присутствии людей. Время обеззараживания - 30 - 40 мин. Облучение воздуха необходимо проводить после уборки помещения, смены постельного белья и других работ, связанных с формированием пылевого аэрозоля.

В специализированных отделениях больницы персоналу целесообразно носить респираторные маски.

Организация санитарно-гигиенических мероприятий, направленных на предупреждение ротавирусной инфекции, проводится в соответствии с действующими инструкциями и рекомендациями для других инфекций с фекально-оральным механизмом распространения возбудителя.

Одной из действенных мер профилактики ротавирусной инфекции у новорожденных является их грудное вскармливание.

Специфическая профилактика ротавирусной инфекции не проводится.

Далеко не всегда врачу удается дать определение и выставить диагноз на основании клинической картины. Достоверным диагностическим критерием будет сдача анализа кала. Метод диагностики дорогостоящий и используется нечасто.

Фармацевтическая промышленность выпустила в аптечную сеть тесты для определения в организме ротавируса.

Доктора при постановке диагноза руководствуются симптомами:

1. Выраженная тянущая боль в животе с урчанием и бурлением.
2. Жидкий стул. В начале желтоватой окраски, затем – сероватой. Резкий кислый запах.
3. Многократная рвота, приводящая к развитию обезвоживания.
4. Повышенная температура.
5. Признаки интоксикации.

От постановки диагноза будут зависеть клинические рекомендации по , которые даст врач.

Инкубационный период заболевания – от 1 до 4 дней. Развивается постепенно или отличается острым началом.

Постепенное развитие

При постепенном развитии – характерные клинические особенности: заболевание дебютирует симптомами респираторного характера, затем присоединяется кишечная симптоматика.

Заболевание протекает остро на протяжении 5 суток, затем стихает.

Острое развитие

Клиника ротавирусной инфекции у детей младшего возраста протекает стремительно. Повышается температура, развиваются рвота и диарея.

На фоне потери жидкости нарастает дегидратация. Ребёнок становится вялым и слабым.

Синдром дегидратации

В этой ситуации важно отпаивать большим количеством жидкости. Предлагайте питье по паре глотков через 10-15 минут.

Под питьём понимают чистую воду или солевые растворы. Используйте отвар ромашки или шиповника, компот из сухофруктов.

Развитие скорого обезвоживания – опасный синдром для ребёнка на первом году жизни. Провоцирует нарушение сердечного ритма, судорожный синдром и недостаточность функции почек.

Лечение – в стационаре под контролем доктора.

Особенности лечения

Ротавирусная инфекция у детей отличается от болезни у взрослых и требует особого подхода.

Нет специфических этиотропных средств для борьбы с ротавирусами. Лечение основывается на устранении патогенетических механизмов и симптомов. Выведены стандарты, определяющие лечение ротавирусной инфекции у детей.

Не всегда дают ребёнку лекарство для приёма внутрь из-за сильной рвоты. Назначаются ректальные суппозитории от температуры, для снятия спазма и боли.

Если выражена диарея, применение свечей отменяется. При дегидратации вводят дезинтоксикационные препараты инфузионным капельным способом.

Методическое руководство по кишечным вирусным инфекциям не рекомендует применение антибиотиков.

При ротавирусе присоединяется вторичная инфекция – кишечная палочка или стафилококк. В этих случаях назначают ребёнку «Доксициклин» для устранения бактериальной инфекции.

Особенности ухода за больным малышом

Для снижения температуры тела применяют физические методы воздействия – обтирание водой комнатной температуры; рекомендуется раздеть ребёнка и подержать при комнатной температуре несколько минут.

Если температура повышена, на время приложить пузырь со льдом рядом к голове ребёнка.

Родители интересуются о пользе клизмы при ротавирусной инфекции. Процедуру допустимо применять с осторожностью.

Ротавирус убивается под воздействием кварцевого облучения. Используют ультрафиолет для дезинфекции помещения, где находился больной ребёнок, для обработки игрушек и предметов обихода.

Питание при кишечном гриппе

При кишечном гриппе частью лечения становится правильное питание.

Диета при ротавирусе строгая. Если у ребёнка заболевание протекает тяжело и сопровождается неукротимой рвотой, первые сутки ребёнок голодает.

Исключается из рациона молочная продукция. Это связано с недостаточностью лактазы в кишечнике детей при остром течении ротавирусной инфекции.

Исключить сладкие и жирные блюда, мясо и соленья.

Питаться полужидкими кашами на воде и супчиками на овощном бульоне.

Полезен при выраженной диарее рис. Из него готовят рисовый отвар и пьют небольшими порциями для устранения диареи и восполнения потерь жидкости в организме.

Для устранения симптомов обезвоживания у детей – обильно поите. Готовьте солевые растворы или отвары лекарственных растений. Эффектом характеризуется отвар шиповника или компот из сухофруктов.

После купирования острой клинической картины постепенно расширяется рацион малыша.

Готовьте пюре из овощей и фруктов. Мясные и рыбные блюда – в отварном виде или на пару. Выбирайте нежирные сорта мяса. Давайте малышу при ротавирусе домашние кисели и каши.

Если ротавирусной инфекцией болеет ребёнок, находящийся на грудном вскармливании, его переводят на кормление безлактозными смесями на период заболевания и реабилитации – несколько недель.

Чего не следует делать

При ротавирусной инфекции у ребёнка не промывать желудок. Процедура травматична и вымывает полезные компоненты, ускоряющие выздоровление.

Таким эффектом отличается клизма при ротавирусной инфекции. Исключение – выраженная рвота или понос, когда малыш ослаблен.

Не принимаются без назначения врача лекарственные препараты или народные средства, уменьшающие рвоту или понос. Они снизят скорость выведения из организма возбудителя инфекции. Вирусные частицы задержатся в организме и утяжеляют патологический процесс. Развиваются осложнения.

Если ребёнок отказывается от пищи, не заставляйте его. В остром периоде заболевания щадят воспаленный кишечник, не давая нагрузки; поить малыша обязательно. Предлагайте питьё через каждые 5-10 минут. При сохранности аппетита питание дробное и маленькими порциями.

Необходимость иммунизации против другой уточненной одной вирусной болезни (Z25.8), Ротавирусный энтерит (A08.0)

Краткое описание

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

СОЮЗ ПЕДИАТРОВ РОССИИ

Вакцинопрофилактика ротавирусной инфекции у детей

Год утверждения (частота пересмотра) : 2017 (пересмотр каждые 3 года)

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Ротавирусная инфекция (РВИ) - антропонозное высококонтагиозное острое инфекционное заболевание, характеризующееся преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) в виде гастроэнтерита с симптомами диареи и рвоты, развитием общей интоксикации, дегидратации и нередко наличием респираторного (катарального) синдрома в начальном периоде болезни.

ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЯ

Ротавирус (РВ) относится к семейству Reoviridae, подсемейству Sedoreovirinae, роду Rotavirus, который включает значительное число сходных по морфологии и антигенной структуре вирусов, способных вызывать гастроэнтериты у млекопитающих и птиц.

Вирион РВ имеет диаметр 65-75 нм и состоит из электронно-плотного центра (сердцевины) и двух белковых оболочек — внутреннего и наружного капсида . Сердцевина содержит внутренние белки и фрагментированную цепь рибонуклеиновой кислоты (РНК), состоящую из 11 сегментов, которые кодируют продукцию белков — шесть структурных (Viral Proteins, VP1-VP7: VP1, VP2, VP3, VP4, VP6 и VP7) и пять неструктурных (NSP1-NSP5). Основным компонентом внутреннего капсида является структурный белок VP6 (основная группоспецифическая антигенная детерминанта РВ). В зависимости от его строения РВ подразделяют на 7 серологических групп — A, B, C, D, E, F, G. Наружный капсид вириона образован двумя структурными белками, к которым в организме человека (как в случае инфицирования, так и в результате вакцинации) вырабатываются вируснейтрализующие антитела — VP7 (гликопротеиновый белок, или G-протеин) и VP4 (белок, чувствительный к действию протеаз, или Р-протеин). Данные структурные белки, определяя серотип, обеспечивают адсорбцию вируса и его проникновение в эпителиоциты тонкого кишечника.

В настоящее время известно 27 разновидностей G-генотипов и 35 Р-генотипов РВ, из которых 10 G-серотипов (G1-6, 8-10 и 12) и 7 Р-серотипов (P1, 2A, 3, 4, 5A, 8, 11) могут вызывать заболевания у людей. В 98% случаев РВИ у человека вызывают РВ серогруппы А. РВ группы С распространены повсеместно и вызывают в основном спорадическую заболеваемость. РВ группы В имеют эндемичное распространение в некоторых странах Юго-Восточной Азии и способны вызывать групповые заболевания. Патогенные для животных и птиц РВ не способны вызывать острые кишечные инфекции (ОКИ) у человека. Практически 90% всех циркулирующих штаммов относятся к одному из 5 генотипов ― G1P, G2P, G3P, G4P, G9P. По данным российских исследователей, превалирующее большинство возбудителей ротавирусного гастроэнтерита (РВГЭ) идентифицируются как штаммы G1P и G4P — 46%, PG4 — 38%, PG3 — 6%, PG2 — 10% . Среди РВ серогруппы А, способных вызывать заболевание у человека, выделяют:

Повсеместно распространенные серотипы ― G1P1A, G3P1A, G4P1A, G9P1A, G2P1B, G9P2A;

Серотипы, имеющие региональное распространение, ― G5P1A, G8P1B, G1-4, 8P2A, G3P5;

Малораспространенные серотипы.

Для клинической практики важно, что существующие вакцины способны предупреждать заболевания, вызванные разными серотипами.

РВ чрезвычайно стабилен в окружающей среде. Возбудитель устойчив к хлорсодержащим дезинфицирующим средствам, препаратам на основе перекиси водорода; не погибает при обычном хлорировании воды в головных водопроводных сооружениях, выживает в водопроводной воде до 60 дней, на различных объектах внешней среды ― от 10 до 30 дней (в зависимости от температуры, влажности воздуха и наличия загрязнений органической природы); не разрушается при многократном замораживании. Ультрафиолетовое излучение в дозе 9 вт/м2 инактивирует вирус через 15 минут. В фекалиях РВ сохраняется от нескольких недель до 7 месяцев, на фруктах ― от 5 до 30 дней, на тканях из хлопка и шерсти ― от 12 до 45 дней, на различных поверхностях ― до 10 дней, а с органическими загрязнениями ― до 16 дней. Возбудитель РВИ устойчив к эфиру, хлороформу, детергентам, гипохлориту (в низких концентрациях), к воздействию ультразвука, однако быстро инактивируется фенольными соединениями, крезолом, формалином. РВ утрачивает вирулентность при кипячении, обработке сильными кислотами и щелочами (инфекционная активность сохраняется в диапазоне рН 3−9). Протеолитические ферменты желудочно-кишечного тракта (панкреатин, трипсин, эластаза) усиливают инфекционную активность возбудителя. Белковая структура РВ разрушается в растворах поверхностно-активных веществ, прогревание при 70 °С инактивирует вирус в течение 10 минут, при 80 °С ― в течение 1 минуты. Такая высокая устойчивость РВ предопределяет важность вакцинопрофилактики как единственного действенного метода борьбы с этой инфекцией.

Этиология и патогенез

ПАТОГЕНЕЗ

РВ преимущественно поражает зрелые энтероциты на верхушках ворсинок тонкого отдела кишечника. Первоначально прилипание вируса к поверхности чувствительных к нему клеток кишечника происходит с помощью белков VP4 наружного капсида, которые связываются с рецепторами на поверхности энтероцита. Затем вирусная частица встраивается в ядро клетки с целью репликации новых вирусных частиц. Изменение метаболизма клетки приводит к ее гибели вследствие высвобождения лизосомных ферментов, что в свою очередь облегчает выход из клетки вновь образованным вирионам. В результате проникновения вирусных частиц внутрь клетки происходит нарушение физиологического процесса всасывания, и значительно повышается синтез фосфолипидов и белков. Иными словами, основной причиной осмотической диареи при РВГЭ является цитопатогенное воздействие на энтероциты неструктурного белка вируса NSP4 (подобие энтеротоксина у бактерий), что обусловливает нарушение секреции воды и электролитов путем активации хлоридных каналов.

Защиту против РВИ обеспечивает как гуморальный, так и клеточный компоненты иммунной системы. Результатом инфицирования РВ становится выработка нейтрализующих антител против белков наружного капсида возбудителя VP7 и VP4. Кроме того, важнейшим защитным механизмом является включение местного звена иммунитета и синтез иммуноглобулинов класса A против белков внутреннего капсида VP6. После первого инфицирования серологический ответ направлен преимущественно против специфического серотипа вируса: он непродолжительный, тогда как при следующих эпизодах РВИ возникает более широкий гетеротипный иммунный ответ. Перекрестно-реагирующие антитела, способные нейтрализовать другие варианты вирусов, являются одними из факторов, объясняющих снижение частоты и тяжести течения болезни при повторном инфицировании . Проспективное наблюдение с участием детей, посещающих детские дошкольные учреждения, показало, что случаи бессимптомной РВИ встречались в 3-4 раза чаще, чем клинически выраженные. Именно таким образом бессимптомные РВИ поддерживают циркуляцию возбудителя, обеспечивая популяционный иммунитет и, с другой стороны, могут служить причиной вспышечной заболеваемости, в частности внутрибольничных диарей (см. раздел «Эпидемиология»).

Источник инфекции ― человек (больной или вирусовыделитель). В фекалиях может содержаться значительное количество вирусных частиц ― до 1010−1011 в 1 г. Механизм передачи РВ ― фекально-оральный: реализуется пищевым, водным и контактно-бытовым путем. Учитывая крайне высокую контагиозность РВ и устойчивость возбудителя к средствам бытовой химии, даже очень строгие меры гигиены (в т.ч. мытье рук после каждого контакта с больным) зачастую могут оказаться неэффективными. Инкубационный период составляет всего несколько суток ― в среднем от 1 до 3 дней.

Эпидемиология

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ РОТАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ

Эпидемиология ротавирусной инфекции в мире

До сих пор пневмония и инфекционные диареи являются основной причиной смертности детей первых 5 лет жизни в результате инфекционных заболеваний. Ежегодно более 1 млн детей грудного и раннего возраста умирает от пневмококковой инфекции и ротавирусной диареи. На долю последних приходится до 9,9% в структуре общей смертности детей за 2011 г., причем значительную часть из них (70%) составляют дети в возрасте младше 2 лет . Основываясь на данных европейских эпидемиологических исследований, за последнее столетие среди возбудителей острых гастроэнтеритов у детей значительно превалируют вирусы. Среди них наибольший удельный вес приходится на Rotavirus и в меньшей степени Norovirus (англ. Norwalk Virus), тогда как Campylobacter и Salmonella — основные бактериальные агенты —серьезно уступают .

РВ является ведущей причиной гастроэнтеритов у детей в возрасте младше 5 лет как в странах с низким, так и с высоким экономическим уровнем развития. Разницу составляет высокий уровень смертности от РВИ, наиболее характерный для развивающихся государств и достигающий почти 82% всех смертельных случаев от РВИ на планете. В довакцинальный период от тяжелых гастроэнтеритов ротавирусной этиологии ежегодно погибало до 527 000 человек, из них 440 000 детей младше 5-летнего возраста, по этой причине госпитализация достигала 2 млн детского населения, нагрузка на амбулаторное звено составляла до 25 млн визитов каждый год. По заключению Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), уровень смертности от РВГЭ в 2008 г. среди детей в среднем достигал 453 000, что ставило РВИ в ряд наиболее частых причин смертности от вакциноуправляемых инфекций.

РВИ оказывает значительную нагрузку на медицинские учреждения как стационарного, так и амбулаторного звена. По обобщенным данным, полученным из 35 стран с разным уровнем экономического развития, около 40% госпитализаций по поводу диареи у детей в возрасте до 5 лет связаны с РВИ (1986−2000 гг.) . В странах Европы РВГЭ диагностируется у 5-27% всех госпитализированных детей раннего и грудного возраста. Кроме того, РВИ является одной из основных причин внутрибольничных диарей, составляя в разные сезоны от 31 до 87%. Речь идет о случаях РВГЭ, который развивается через 48-72 ч после госпитализации по причине, не связанной с диареей. В данном случае источником внутрибольничной инфекции становятся как пациенты с клинически значимыми формами РВИ, так и ее носители, в том числе медицинский персонал.

В развивающихся странах 3/4 детей сталкиваются с РВГЭ на первом году жизни, в экономически развитых государствах первый эпизод данной инфекции возникает несколько позже — к 2-5 годам (по данным на 2011 г.). При этом тяжесть течения РВИ, в первую очередь связанная с развитием обезвоживания, обусловливает обращение к специалисту каждого пятого заболевшего; 1 из 65 больных требует госпитализации и 1 из 293 погибает от обезвоживания. Тяжелое течение РВГЭ с обезвоживанием наблюдается преимущественно в группе детей в возрасте 6-24 месяцев жизни, что обусловливает госпитализацию 65-85% детей первого года жизни, причем столь высокая частота стационарной помощи не зависит от уровня экономического развития страны. Среди госпитализируемых до 43% имеют тяжесть более 15 баллов по шкале Vesikari 1 , у 7% наблюдаются признаки динамической непроходимости, у 3% — кровь в стуле; 27% больных требуют проведения внутривенной регидратации . В результате этого огромное количество амбулаторных визитов по поводу РВИ средней и легкой тяжести оказывает серьезную нагрузку на систему здравоохранения.

В развивающихся странах случаи заболеваний РВИ регистрируются практически круглый год, тогда как в развитых государствах отмечается зимняя сезонность, взаимосвязанная с сопутствующей интеркуррентной заболеваемостью, вызванной нозокомиальной флорой.

Эпидемиология ротавирусной инфекции в Российской Федерации

В России общая заболеваемость ОКИ традиционно остается на высоком уровне и устойчиво занимает 3-4-е место среди всех инфекционных заболеваний у детей. В РФ за последние 15 лет этиологическая верификация вирусных кишечных инфекций значительно улучшилась, о чем свидетельствует рост показателей заболеваемости населения РВИ: с 3,2 на 100 тыс. населения в 1993 г. до 83,26 ― в 2016 г. по данным государственного доклада «О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в РФ в 2016г.».

Эпидемиологическое исследование, проведенное ВОЗ в 2005-2007 гг. в 8 городах России в рамках проекта «Эпидемиология вирусных кишечных инфекций в России. Разработка подходов для выявления и характеристики возбудителей», показало, что РВ являлся причиной гастроэнтеритов в 43% случаев у детей до 5 лет, находящихся на стационарном лечении.

Проведенное в 2012 г. проспективное наблюдательное активное эпидемиологическое исследование «Эпидемиология и социоэкономический ущерб, вызванный ротавирусным гастроэнтеритом в амбулаторном звене в Российской Федерации» показало, что РВГЭ составляют 31% от числа всех амбулаторных обращений к врачу по поводу гастроэнтеритов, достигая 75% в некоторых регионах РФ.

В среднем, по данным на 2014 г., заболеваемость детей до 1 года составила 1180,07, а в возрасте 1−2 лет ― 1351,37 на 100 000. В целом по РФ удельный вес заболевших РВГЭ детей до 1 года составил 20,6%, в возрасте 1−2 лет ― 44,7%. Для различных субъектов РФ показатель заболеваемости колеблется от 31,08 в Карачаево-Черкессии до 3145,66 на 100 000 в Бурятии. Описаны водные эпидемии РВИ, при которых заболеваемость детей 1−2 года достигала 9 000 на 100 000 населения. Такая неравномерность в уровне заболеваемости связана, в первую очередь, с отсутствием этиологической расшифровки диагноза и, как следствие, необъективностью регистрации РВГЭ.

В заболеваемости РВГЭ на территории РФ выявляется сезонность — преимущественно зимне-весенний период (декабрь-апрель).

С РВГЭ связаны существенные расходы, как прямые (связанные с оказанием медицинской помощи), так и косвенные (уход за ребенком, больничный лист), а также эмоциональная нагрузка на семьи, в т.ч. значительный уровень стресса . В частности, российские эксперты оценили затраты на 1 случай РВИ в 17 394 руб. . Ежегодная вакцинация 95% новорожденных против РВИ позволила бы снизить затраты, обусловленные РВИ, на 45,31 млрд. руб., из них 18,98 млрд. руб. ― это затраты на амбулаторные случаи РВИ, а 26,33 млрд. руб. ― на случаи РВИ, потребовавшие госпитализации .

1 Оценка степени тяжести РВИ проводится на основании комплекса лабораторных параметров, включающего отдельные показатели периферической крови (число лейкоцитов, нейтрофилов, лимфоцитов, гемоглобин), уровень С-реактивного белка, калия и натрия, рН, мочевины, глюкозы, печеночных трансаминаз. Согласно шкале Везикари (Timo Vesikari), течение заболевания у пациентов с суммой показателей ниже 9 баллов расценивается как легкое, от 12 до 15 —как среднетяжелое, от 16 до 20 —как тяжелая форма РВИ.

Клиническая картина

Cимптомы, течение

КЛИНИЧЕСКАЯ КАРТИНА

Клиническая картина РВИ характеризуется острым началом, проявлениями энтерита (водянистая диарея, умеренные боли в животе, метеоризм), симптомокомплексом интоксикации с повышением температуры тела и нередко катаральным синдромом. Однако, при РВИ отсутствуют патогномоничные клинические признаки, позволяющие четко дифференцировать это заболевание от ОКИ другой этиологии.

Лихорадка (субфебрильная и фебрильная) ― наиболее характерный признак РВИ при проведении дифференциального диагноза с норовирусной инфекцией ― практически всегда сопровождает РВИ и наблюдается у 85-95% больных. Среди других симптомов интоксикации отмечают слабость, а также головокружение и озноб. Часть больных госпитализируется в соматическое отделение с высокой температурой, тогда как диарея начинается позже. Число бессимптомных носителей вируса среди госпитализируемых детей может достигать 5-7%.

Более чем у половины заболевших одним из первых симптомов является рвота, которая нередко бывает повторной, но в большинстве случаев прекращается в первые сутки болезни. У отдельных пациентов рвота возникает одновременно с диареей. Позывы к дефекации внезапны, часты, императивны; испражнения носят выраженный энтеритный характер (жидкие, водянистые, пенистые), в тяжелых случаях ― холероподобный; частота стула может достигать 20−30 в сутки. У большинства пациентов имеют место умеренно выраженные но-ющие или схваткообразные боли с локализацией в эпи- и мезогастрии, метеоризм и урчание в животе.

Внекишечные осложнения РВИ . Возможно развитие таких осложнений, как дегидратация (велика вероятность у детей раннего возраста), эксикоз, присоединение бактериальных осложнений; в тяжелых случаях РВГЭ может привести к некротическому энтероколиту и геморрагическому гастроэнтериту, патологии печени и почек. Развитие РВ-суперинфекции (нередко в кишечных отделениях) существенно осложняет течение болезни.

Помимо гипонатриемии, при неправильном водном режиме РВГЭ может стать причиной отека мозга, ДВС-синдрома, острой почечной недостаточности и других жизнеугрожающих состояний. В работах зарубежных авторов указывается возможность поражения центральной нервной системы у детей при тяжелом течении РВГЭ, подтвержденного обнаружением в ликворе РНК возбудителя. Помимо поражения желудочно-кишечного тракта в виде гастроэнтерита, у этих пациентов отмечались судороги, нарушения сознания и речи различной степени, атаксия. У половины больных при спинномозговой пункции определялся плеоцитоз, также были выявлены соответствующие патологические изменения на электроэнцефалограмме и компьютерной томограмме. Описаны случаи развития энцефалопатии, менингоэнцефалита и сопутствующего церебеллита. В таких ситуациях вероятность развития летального исхода серьезно возрастает.

Прогноз заболевания при адекватной гидратации , как правило, благоприятный, длительность болезни редко превышает 5−7 дней.

После перенесенного РВГЭ ребенок может заразиться повторно из-за сезонной смены циркулирующих серотипов РВ, но перенесенная естественная инфекция может снижать тяжесть течения последующих инфекций.

Диагностика

Основным методом диагностики является иммуноферментный анализ, определяющий ротавирусный антиген в кале. Менее чувствительные методы, но простые в употреблении и дающие быстрый результат, — тест-полоски и реакция латекс-агглютинации. Обратно-транскриптазная полимеразная цепная реакция, высокочувствительная в отношении малых концентраций РВ в копрологическом субстрате, используется для идентификации штамма и дальнейшей дифференциации возбудителя.

Профилактика

ПРОФИЛАКТИКА РОТАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ

Специфическая профилактика

Учитывая высокую контагиозность РВИ и недостаточную эффективность неспецифических мер профилактики (санитарно-гигиенических мероприятий), а также отсутствие этиотропной терапии, в настоящее время единственным наиболее эффективным методом контроля уровня заболеваемости признается вакцинация : рекомендации о всеобщей иммунизации детей младенческого возраста против РВИ имеют уровень доказательности 1А (табл. 1) . ВОЗ настоятельно рекомендует включить ротавирусную вакцину в национальные программы иммунизации всех стран мира, сопровождая программу иммунизации обстоятельным эпидемиологическим и постмаркетинговым надзором в национальных масштабах. В то же время ВОЗ отмечает, что отсутствие эпидемиологического надзора не должно являться препятствием для внедрения вакцинации.

Вакцинация против РВИ должна быть частью комплексной программы по контролю диарейных заболеваний (наряду с грудным вскармливанием, мытьем рук, улучшением водоснабжения, оральной регидратации и пр.). При включении вакцинации против РВИ необходимо добиваться максимального охвата. Только универсальная массовая вакцинация может привести к контролю заболеваемости. Вакцинация групп риска не несет значительной пользы для здравоохранения. При этом ВОЗ продолжает рекомендовать введение первой дозы ротавирусной вакцины как можно раньше — по достижении ребенком 6-недельного возраста — одновременно с вакциной против дифтерии, коклюша и столбняка (АКДС) с тем, чтобы индуцировать защиту до естественного инфицирования РВ .

При проведении вакцинопрофилактики РВИ необходимо руководствоваться действующими нормативными и методическими документами по организации иммунизации, и прежде всего Национальным календарем профилактических прививок РФ и Календарем профилактических прививок по эпидемическим показаниям (Приказ МЗ РФ № 125н от 21.03.2014), а также Инструкцией по применению иммунобиологического препарата.

Характеристика ротавирусной вакцины

Существующие в настоящее время вакцины представляют собой препараты для приема внутрь, содержащие живые аттенуированные штаммы РВ человеческого и/или животного происхождения, репликация которых происходит в тонком кишечнике человека. На международном рынке используются две пероральные ротавирусные вакцины — моновалентная вакцина (RV1) Ротарикс (Rotarix; GlaxoSmithKline Biologicals, Rixensart, Бельгия) и пентавалентная вакцина (RV5) РотаТек (RotaTeq; Merck & Co. Inc., West Point, PA, США). Кроме того, в странах Юго-Восточной Азии применяют моновалентную ротавирусную вакцину, выращенную из бараньего РВ (производство Института биомедицинских препаратов Ланжоу в Китае), и вакцину Ротавин-М1 (Rotavin-M1; Polyvac, Вьетнам).

В РФ зарегистрирована единственная вакцина против РВИ ― РотаТек (раствор для приема внутрь; туба 2 мл; № ЛП-001865). Одна доза вакцины (2 мл) содержит следующие действующие вещества: живые реассортанты человеческого и бычьего ротавирусов, выращенные на культуре клеток Веро: РВ типа G1 ― не менее 2,2 × 10 6 ИЕ 2 , РВ типа G2 ― не менее 2,8 × 10 6 ИЕ, РВ типа G3 ― не менее 2,2 × 10 6 ИЕ, РВ типа G4 ― не менее 2,0 × 10 6 ИЕ, РВ типа P1A ― не менее 2,3 × 10 6 ИЕ . В состав вакцины входят вспомогательные вещества: сахароза 1080 мг, натрия гидроксид 2,75 мг, натрия цитрата дигидрат 127 мг, натрия дигидрофосфата моногидрат 29,8 мг, полисорбат-80, ротавирусный растворитель.

ПВРВВ ― это живая пероральная пентавалентная ротавирусная вакцина (ПВРВВ), содержащая пять живых реассортантных штаммов ротавируса (бычьих и человеческих). На поверхности четырех вакцинных реассортантов РВ расположен один из наружных капсидных белков VP7 (серотипы G1, G2, G3 или G4) человеческого штамма РВ и белок VP4 (серотип P7) бычьего штамма РВ (белок VP4 отвечает за прикрепление РВ к поверхности клеток). На поверхности пятого реассортанта вируса экспрессирован белок VP4 (серотип P1A) человеческого штамма ротавируса и наружный капсидный белок VP7 (серотип G6) бычьего родительского штамма РВ. Каждый из реассортантов выращен по отдельности на культуре клеток Веро стандартными культуральными методами без использования противогрибковых препаратов и очищен, а затем реассортанты все вместе помещены в буферный стабилизирующий раствор.

После полного курса вакцинации ПВРВВ у 92,5-100% вакцинированных в сыворотке наблюдается значительное повышение уровня нейтрализующих иммуноглобулинов класса A ко всем пяти капсидным белкам РВ человека, содержащимся в реассортантах вакцины (G1, G2, G3, G4 и Р1А), которые соответствуют циркулирующим в России серотипам.

Показания к проведению вакцинации

Активная иммунизация детей в возрасте от 6 до 32 недель с целью профилактики гастроэнтерита, вызываемого ротавирусами серотипов G1, G2, G3, G4 и серотипов G, содержащих Р1А (например, G9).

Противопоказания

Повышенная чувствительность к любому компоненту вакцины, а также сильная реакция на предыдущее введение ПВРВВ.

Инвагинация кишечника в анамнезе.

Врожденные пороки развития желудочно-кишечного тракта, предрасполагающие к инвагинации кишечника (врожденный синдром мальабсорбции, болезнь Гиршпрунга, синдром короткой кишки, оперативное лечение кишечника в анамнезе).

Внекишечная локализация врожденной патологии (Spina bifida, экстрофия мочевого пузыря).

Иммунодефицитное состояние (в случае подозрения на наличие иммунодефицитного состояния необходимо исключить данный диагноз).

Наличие в семье больных с иммунодефицитными состояниями.

Установленная генетически обусловленная непереносимость фруктозы, нарушение всасывания глюкозо-галактозного комплекса, недостаточность ферментов сахаразы и/или изомальтазы.

Острая форма диареи или рвоты (вакцинацию проводят на стадии ремиссии).

Схема и организация проведения вакцинации

Схема введения. Первая доза препарата ПВРВВ вводится в возрасте от 6 до 12 нед, что обеспечивает максимальную безопасность пациенту.

Эффективность и безопасность ПВРВВ не были установлены у детей в возрасте младше 6 и старше 32 нед жизни.

Вакцинация против ротавирусной инфекции проводится в рамках календаря профилактических прививок по эпидемическим показаниям (Приказ МЗ РФ № 125н от 21.03.2014, Приложение № 2) с учетом сроков введения вакцин Национального календаря профилактических прививок :

1) максимально соответствующая инструкции схема вакцинации: 1-я доза ― в возрасте 2 мес одновременно с пневмококковой вакциной; 2-я и 3-я дозы ― в 3 и 4,5мес (или в 4,5 и 6 мес), соответственно, и одномоментно с вакцинами национального календаря.

2) при схеме 3−4,5−6 мес ПВРВВ может вводиться одновременно с другими плановыми вакцинами.

Организация процедуры. Вакцинация должна проводиться в кабинете иммунопрофилактики при наличии средств противошоковой терапии после предварительного осмотра ребенка педиатром и термометрии. После вакцинации ребенок должен находиться под наблюдением не менее 30 мин.

В случае если ребенок выплюнул или срыгнул часть вакцины, вводить дополнительную дозу не рекомендуется, так как измененный режим дозирования не изучался в клинических исследованиях. Оставшиеся дозы следует вводить согласно схеме вакцинации.

Непосредственно после проведения вакцинации возможны кормление ребенка, прием чая, соков и других жидкостей.

Возможность одновременной вакцинации с другими вакцинами

ПВРВВ можно вводить детям одновременно (в один день) с любыми вакцинами Национального календаря профилактических прививок и прививок по эпидемическим показания кроме вакцины БЦЖ/БЦЖ-м.

Одновременное введение нескольких вакцин, в том числе оральной полиомиелитной вакцины (ОПВ) с ПВРВВ не влияет на выработку иммунного ответа. При необходимости одновременного введения ПВРВВ с ОПВ, рекомендуется первоначально дать ребенку одну оральную вакцину, затем провести необходимые инъекции и далее закапать вторую оральную вакцину.

Общие принципы вакцинации детей с различной патологией

Общие принципы вакцинации детей с сопутствующей патологией

1. Прививки проводят под наблюдением сертифицированного врача кабинета иммунопрофилактики. После вакцинации ребенок должен находиться под наблюдением не менее 30 мин.

2. Вакцинация осуществляется на фоне противорецидивной (базисной) терапии при согласовании со специалистом. Прививки проводят через 2 нед после стабилизации процесса или начала ремиссии.

3. При проведении вакцинации у детей с поражением нервной системы, особенно с фебрильными судорогами в анамнезе, также рекомендуется измерение температуры после вакцинации 3-4 раза в сут первые 3 дня, по показаниям назначается жаропонижающее средство.

4. При проведении вакцинации у детей с аллергией показано строгое соблюдение диеты (ребенком/матерью) с исключением продуктов, на которые ранее отмечались аллергические реакции, «облигатных» аллергенов, а также строгое поддержание гипоаллергенного быта за 1 нед до вакцинации и в течение 2 нед после нее. Вакцинация выполняется через 1−2 нед после достижения стабилизации процесса, контроля над заболеванием или начала ремиссии. Проводится согласованная с врачом-аллергологом базисная терапия аллергического заболевания, на фоне которой был достигнут контроль над болезнью. Возможно назначение антигистаминного препарата в возрастной дозировке в день вакцинации и в течение 3 дней после нее.

Вакцинация особых групп детей

Недоношенные дети . Вакцину можно применять у недоношенных детей, родившихся при сроке беременности не менее 25 нед; препарат следует вводить таким детям не ранее чем через 6 нед после рождения.

Вакцинация ВИЧ инфицированных детей . Маловероятно, что бессимптомная ВИЧ-инфекция будет влиять на безопасность и эффективность ПВРВВ. Тем не менее подтвержденных клинических данных по вакцинации детей с перинатальным контактом по ВИЧ-инфекции, пациентов с подтвержденной ВИЧ-инфекцией при отсутствии признаков иммунодефицита не достаточно.

Детям, которым в течение последних 42 дней проводилась гемотрансфузия или вводились иммуноглобулины , вакцинацию проводят с осторожностью.

Поствакцинальные реакции

Вакцина обычно хорошо переносится.

В соответствии с международными требованиями при изучении безопасности вакцины учитывались любые симптомы и заболевания (нежелательные явления), развивающиеся в поствакцинальном периоде в течение 1 мес. При этом большинство из них (инфекции верхних дыхательных путей, ринит, отит и пр., а во многих случаях и диарея) не имеют этиопатогенетической связи с вакцинацией и являются случайно совпавшими по времени заболеваниями в поствакцинальном периоде.

В табл. 2 приведены данные по частоте возникновения тех или иных нежелательных явлений при проведении вакцинации.

Результаты пострегистрационных исследований не подтверждают повышения риска возникновения инвагинации кишечника после вакцинации ПВРВВ.

При применении ранее созданной вакцины против РВИ (Роташильд), снятой с производства в 1999 г., наиболее серьезным осложнением было развитие инвагинации кишечника (частота 1:10 000-1:32 000, в основном на 1-ю дозу у детей в возрасте старше 90 дней жизни). Это и предопределило пристальное внимание к рассматриваемой патологии в ходе проведения иммунизации против РВИ.

Инвагинация кишечника — непроходимость пищеварительного органа, причиной которой является внедрение одной части кишечника в просвет другой. Встречается чаще у детей первого года жизни (85-90%), преимущественно в возрасте от 4 до 9 месяцев. В среднем частота развития инвагинации составляет 1 случай на 2000-3000 привитых. У детей старше 1 года инвагинация наблюдается редко и в большинстве случаев бывает связана с органической природой заболевания (дивертикул подвздошной кишки, гиперплазия лимфоидной ткани, полип, злокачественное новообразование и др.). Увеличение случаев инвагинации кишечника с 4 месяцев в целом в популяции стало основанием для ограничения начала иммунизации против РВИ возрастом 6-12 недель. Стоит отметить, что на фоне применения ПВРВВ инвагинация встречается не чаще, чем при приеме плацебо (0,043 и 0,037%, соответственно, по данным крупного клинического исследования REST; см. раздел «Эффективность и безопасность»). Однако, надо понимать, что вероятность развития инвагинации значимо ниже риска развития тяжелого РВГЭ у непривитого ребенка грудного возраста.

Таким образом, приведенные данные свидетельствует о том, что эффективность и польза ротавирусной вакцинации значимо перевешивает возможный минимальный риск возникновения инвагинации . Для уменьшения риска важно не нарушать рекомендованных сроков введения первой дозы вакцины. Тем не менее, в течение 31 дня после первой вакцинации и, особенно, в первые 7 дней поствакцинального периода, - важно следить за появлением характерных для инвагинации кишечника симптомов (острая боль в животе, неоднократная рвота, наличие крови в кале, вздутие живота) и безотлагательно обращаться за медицинской помощью. Внимательное отношение к симптоматике особенно важно у детей с кишечными коликами, вызывающими сходные болевые симптомы, но без указанных выше рвоты и крови в стуле.

Эффективность и безопасность пентавалентной ротавирусной вакцины

В настоящее время в мировой практике накоплен большой опыт применения ПВРВВ, в результате чего подтверждена ее иммунологическая и клиническая эффективность . После полного курса вакцинации ПВРВВ у 92,5-100% вакцинированных в сыворотке наблюдается значительное повышение уровня нейтрализующих иммуноглобулинов класса A ко всем пяти капсидным белкам РВ человека, содержащимся в реассортантах вакцины (G1, G2, G3, G4 и Р1А), которые соответствуют циркулирующим в России серотипам.

Первые положительные результаты с началом внедрения массовой вакцинации были получены в 2008 г. в США: количество подтвержденных случаев РВИ снизилось на 64%, количество госпитализаций, связанных с этим возбудителем, — на 45% .

При этом вакцинация не только приводит к снижению уровня заболеваемости РВИ в целом, но и защищает от тяжелых форм заболевания, что было неоднократно доказано в ходе многочисленных клинических исследований. Так, по данным американских исследователей, после начала массовой иммунизации против РВИ эффективность ПВРВВ в профилактике РВГЭ любой тяжести составила 68-75%, в отношении тяжелой формы ― 100% , уровень госпитализации пациентов с РВГЭ среднетяжелых и тяжелых форм также значительно снизился —на 86% .

В странах Европы вакцинация против РВИ снижала частоту тяжелых форм ПВГЭ на 81-100%, РИ любой тяжести — на 68-87%. Эффективность ПВРВВ у детей до 2 лет в плане обращений в отделения неотложной помощи составила 94%, госпитализации — 96%, обращений в поликлиники — 86%. Исследования продемонстрировали эффективность вакцин против различных серотипов РВ, даже не входящих в их состав. Снижение госпитализации по поводу диарей любой этиологии среди детей в возрасте 0-2 лет в Бельгии составило 33%, число проведенных койко-дней у пациентов с данной патологией сократилось на 36%. В Финляндии снижение уровня госпитализации достигло 57%, а количество обращений в отделения неотложной помощи —62%.

Исследование случай-контроль показало, что три дозы ПВРВВ дают защиту от РВГЭ в 100% случаев, две дозы имели эффективность 81%, одна — 69% . Данные 11 регистрационных клинических исследований вакцины RV1 и вакцины RV5 продемонстрировали наличие защиты от тяжелого РВГЭ в течение 1 и/или 2 лет наблюдения после вакцинации: 80-90% с умеренным снижением — в течение первого года наблюдения, 40-60% — в течение двухлетнего наблюдения. По данным Минздрава Финляндии, эффект универсальной вакцинации сохранялся в течение 3 лет . В ряде исследований было показано, что массовая вакцинация отодвигала начало сезона РВИ на 2-4 месяца и сокращала его продолжительность в среднем на 12 нед .

Финансовая среднегодовая экономия средств бюджета США, по оценке в 2007-2009 гг., составила 64 855 госпитализаций на сумму 278 млн долларов .

Существуют данные о формировании коллективного иммунитета при массовой иммунизации против РВИ. Достижение широкого охвата вакцинацией способствует снижению заболеваемости у детей более старшего возраста, не подлежащих вакцинации . Например, в Австралии в 2006-2007 гг. в ходе универсальной иммунизации младенцев против РВИ с использованием ПВРВВ заболеваемость РВГЭ снизилась более чем на 50% в возрастной группе 2-4 лет, т.е. у детей, считавшихся слишком взрослыми для проведения вакцинации . Кроме того, внедрение специфической иммунизации в универсальные педиатрические графики вакцинации привело к статистически значимому сокращению уровня заболеваемости во взрослой популяции . В частности, на территории США при активной иммунизации младенцев снизилось количество обращений взрослых пациентов по поводу РВГЭ на 48,4%, что свидетельствует о наличии популяционного иммунитета у ПВРВВ .

Одно из наиболее крупных клинических исследований эффективности и безопасности ПВРВВ — The Rotavirus Efficacy and Safety Trial (REST V260-006) — было спланировано специально для оценки риска инвагинации при использовании вакцины , являлось двойным слепым (заслепленным для спонсора) рандомизированным плацебоконтролируемым и проводилось в рамках III фазы регистрационного исследования. Работа была посвящена широкомасштабному анализу безопасности вакцины (n = 68 038, из них 34 035 были вакцинированы и 34 003 получили плацебо), детализированному изучению серьезных нежелательных явлений (среди 9605 младенцев, из них 4806 вакцинированных и 4799 из группы плацебо), а также исследованию эффективности вакцинации (оценка у 5673 детей, из них 2834 вакцинированных и 2839 из группы плацебо). REST проводилось в 11 с разным уровнем оказания медицинской помощи странах Европы, США и Латинской Америки среди населения с различным уровнем доходов. В рамках клинического исследования здоровые младенцы получали 3 дозы вакцины. Первая доза назначалась детям в возрасте от 6 до 12 недель, остальные две дозы вводились с интервалом 4-10 недель. Таким образом, 59 210 младенцев (86%) получили все 3 дозы вакцины ПВРВВ или плацебо. Менее 1% общего числа участников исследования выпали из-под наблюдения. Соблюдение всех требований протокола, особенно завершение полного трехдозового курса вакцинации, в исследовании REST было достаточно высоким.

Для оценки тяжести РВГЭ использовалась 24-балльная шкала, основанная на частоте и объеме рвоты, диареи, лихорадке и поведенческих изменениях (раздраженность, возбудимость и пр.). В течение первого эпидемического сезона эффективность для профилактики тяжелых РВГЭ составила 98,0% (95% доверительный интервал, ДИ, 88,3-100), в период второго эпидемического сезона после вакцинации - снижение риска составило 88% . При этом эффективность в отношении профилактики РВГЭ в течение первого года после иммунизации любой степени тяжести (от легкой до тяжелой) ― 74,0% (95% ДИ 66,8-79,9).

В течение двух лет после вакцинации общая частота госпитализаций и обращений в приемные отделения клиник по поводу РВГЭ, вызванного серотипами G1-G4, в целом снизилась на 94,5% (95% ДИ 91,2-96,6). Частота госпитализаций снизилась на 95,8%, частота обращений в приемные отделения клиник ― на 93,7% . При проведении данного клинического исследования не было выявлено повышенного риска возникновения инвагинации при применении вакцины ПВРВВ. В целом риск инвагинации при использовании ПВРВВ оценивался как 1-2 случая на 100 000 привитых.

В результате было установлено, что введение первой и последней доз ПВРВВ в рамках рекомендованного возрастного предела не влияет на частоту серьезных побочных проявлений, включая инвагинацию.

Таким образом, польза внедрения массовой вакцинации против РВИ значимо превышает минимальный риск развития инвагинации кишечника. Именно поэтому эксперты ВОЗ рекомендовали включать ротавирусные вакцины в национальные календари иммунизации всех стран мира .

Неспецифическая профилактика

Неспецифическая профилактика РВИ проводится в рамках осуществления противоэпидемических мероприятий при потенциальной угрозе возникновения и распространения ротавирусной инфекции (при наличии предпосылок и предвестников эпидемического неблагополучия), а также в эпидемических очагах при возникновении единичных и групповых заболеваний в соответствии с МУ 3.1.1.2957-11 «Эпидемиологический надзор, лабораторная диагностика и профилактика ротавирусной инфекции».

В целях локализации очага РВИ проводится комплекс санитарно-противоэпидемических мероприятий на основании результатов предварительного эпидемиологического расследования по трем направлениям ― источнику инфекции, путям передачи и восприимчивости организма:

Госпитализация больного осуществляется по клиническим и эпидемиологическим показаниям;

Изоляцию пациентов в домашних условиях с легкими формами РВИ осуществляют в течение 7 дней, после чего переболевший может быть допущен в организованный коллектив (в том числе детский) на основании справки врача о выздоровлении без дополнительного вирусологического обследования;

За лицами, подвергшимися риску заражения, устанавливается медицинское наблюдение сроком на 7 дней: в этот период особое внимание уделяется выполнению гигиенических мероприятий ― тщательному мытью рук, при уходе за больными детьми и пожилыми людьми ― обработке рук спиртосодержащими кожными антисептиками, своевременной замене нательного и постельного белья, проветриванию помещений;

Организуется сбор материала от больных и проб из объектов окружающей среды (питьевая вода, пищевые продукты, смывы с упаковок молочной продукции и т.д.) для вирусологического исследования;

Из числа лиц, подвергшихся риску заражению в очаге, на РВ обследуются только лица с признаками ОКИ;

В целях установления причин и условий формирования эпидемического очага ОКИ при подозрении на РВИ в конкретном учреждении лабораторному обследованию на РВ подлежит декретированный персонал учреждения (сотрудники пищеблока и др.), по решению специалиста, отвечающего за проведение эпидемиологического расследования и организацию противоэпидемических мероприятий. В случае подтверждения наличия РВ в клиническом материале контактные или декретированные лица направляются к врачу, который после проведенного осмотра и при необходимости дополнительных клинических исследований устанавливает диагноз;

В случае установленного вирусоносительства (выделение вируса без клинических проявлений) лица из числа декретированных групп не допускаются к основной работе в течение 7 дней от момента сбора материала для исследования на РВ.

САНИТАРНО-ПРОСВЕТИТЕЛЬНЫЕ МЕРОПРИЯТИЯ В СИСТЕМЕ ПРОФИЛАКТИКИ РОТАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ

Образование врачей-педиатров с целью информирования о возможности и целесообразности вакцинопрофилактики РВИ должно проводиться в разных формах и на различных уровнях:

Федеральном (организация научных конференций, секций на съездах и конгрессах, издание монографий и пособий, публикаций в медицинской периодике);

Региональном (проведение совещаний с участием специалистов различного профиля, проведение обучающих школ и семинаров для организаторов здравоохранения, бактериологов, инфекционистов, педиатров и иммунологов).

Рекомендуется усиление общих санитарно-просветительных и информационно-разъяснительных мероприятий среди родителей, на которых они смогут получить информацию о РВИ и возможности ее вакцинопрофилактики непосредственно на приеме у врача-педиатра, а также через средства массовой информации, наглядные пособия и раздаваемые информационные материалы в детских поликлиниках и прививочных кабинетах.

2 ИЕ ― инфекционная единица.

Информация

Источники и литература

1. Клинические рекомендации Союза педиатров России
   1. 1. McClain B., Settembre E., Temple B.R.S., Bellamy A.R., Harrison S.C. X-ray Crystal Structure of the Rotavirus Inner Capsid Particle at 3,8 A Resolution. J Mol Biol. 2010; 397: 587−599. 2. Patton J.T. Rotavirus diversity and evolution in the post-vaccine world. Discov. Med. 2012; 13: 85–97. 3. Подколзин А.Т., Молочный В.П., Шипулин Г.А., Покровский В.И., Малеев В.В., Мазепа В.Н., Алексеева М.Н., Абрамычева Н.Ю., Сагалова О.И. Надзор за ротавирусной инфекцией по данным госпитализации в отдельных городах РФ за 2005−2007 гг. Инфекционные болезни. 2008; 4: 28−31. 4. Walker C.L., Rudan I., Liu L., Nair H., Theodoratou E., Bhutta Z.A., O’Brien K.L., Campbell H., Black R.E. Global burden of childhood pneumonia and diarrhea. Lancet. 2013; 381: 1405–1416. 5. European Society for Pediatric Gastroenterology, Hepatology, and Nutrition/European Society for Pediatric Infectious Diseases Evidence-Based Guidelines for the Management of Acute Gastroenteritis in Children in Europe: Update 2014. JPGN. 2014; 59: 132–152. 6. European Society for Paediatric Gastroenterology, Hepatology and Nutrition/European Society for Paediatric Infectious Diseases Evidence-based Gidelines for the Management of Acute gastroenteritis in Children in Europe. JPGN. 2008; 46: 81−122. 7. Ротавирусные вакцины Документ по позиции ВОЗ ― январь 2013 г. 1 февраля 2013 г., 88-й год, № 5. Еженедельный эпидемиологический бюллетень. 2013; 88: 49−64. URL: http://www.who.int/wer 8. Stojkovska S., Joksimovic B., Vidinic I., Trajkovska-Dokic E. Evaluation of a rotavirus acute gastroenteritis severity score in hospitalized children over a ten year period in a clinic of infectious diseases, Skopje, R. Macedonia. Prilozi. 2013; 34 (2): 23−33. 9. Van der Wielen M., Giaquinto C. et al. Impact of community-acquired paediatric rotavirus gastroenteritis on family life: data from the REVEAL study. BMC Fam Pract. 2010; 11: 22. PMID: 20230601. URL: http:// www.biomedcentral.com/1471-2296/11/22 10. Mast T.C., DeMuro-Mercon C. et al. The impact of rotavirus gastroenteritis on the family. BMC Pediatr. 2009; 9: 11. PMID: 19200366. URL: http://www.biomedcentral. com/1471-2431/9/11 11. Kostinov M.P., Zverev V.V. Economic effectiveness of vaccination against rotavirus infection in the Russian Federation. Zh Mikrobiol (Moscow). 2012; 3: 50−55. 12. Рудакова А.В., Харит С.М., Усков А.Н. Оценка предотвращенных затрат на терапию ротавирусной инфекции при вакцинации 5-валентной вакциной в Российской Федерации. Ж. инфектологии. 2014; 6 (2). 13. Маянский Н.А., Маянский А.Н., Куличенко Т.В. Ротавирусная инфекция: эпидемиология, патология, вакцинопрофилактика. Вестник РАМН. 2015; 1: 47−55. 14. Захарова И.Н., Есипов А.В., Дорошина Е.А., Ловердо В.Г., Дмитриева Ю.А. Тактика педиатра при лечении острых гастроэнтеритов у детей: что нового? Вопросы современной педиатрии. 2013; 12 (4): 120−125. 15. Гречуха Т.А., Ткаченко Н.Е., Намазова-Баранова Л.С. Новые возможности профилактики инфекционных заболеваний. Вакцинация от ротавирусной инфекции. Педиатрическая фармакология. 2013; 10 (6): 6−9. 16. Mary A. Staat, Daniel C. Payne et al. Effectiveness of the pentavalent rotavirus vaccine against severe disease. Pediatrics. 2011. Р. 267−274. 17. Florence T. Wang, Christopher T. Mast, Roberta J. Glass et al. Effectiveness of the pentavalent rotavirus vaccine in preventing gastroenteritis in the United States. Pediatrics. 2010. Р. 208−213. 18. Cortese M.M., Parashar U.D. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Prevention of rotavirus gastroenteritis among infants and children: recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP). MMWR Recomm Rep. 2009 Feb 6; 58 (RR-2): 1–25. 19. Boom J.A. et al. Effectiveness of pentavalent rotavirus vaccine in a large urban population in the United States. Pediatrics. 2010 Feb; 125 (2): 199−207. Epub 2010 Jan 18. 20. Vesikary T., van Damme P., Giaquinto C. et al. European Society for prdiatric infectious diseases consensus recommendations for rotavirus vaccination in Europe. Pediatr Inf Dis J. 2015; 14 (6): 635−643. 21. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Delayed onset and diminished magnitude of rotavirus activity - United States, November 2007–May 2008. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2008; 57: 697−700. PMID: 18583958. URL: http://www.cdc. gov/mmwr/preview/mmwrhtml/mm5725a6.htm 22. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Reduction in rotavirus after vaccine introduction - United States 2000–2009. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2009; 58: 1146−9. PMID: 19847149. URL: http://www.cdc.gov/mmwr/preview/ mmwrhtml/mm5841a2.htm 23. Cortes J.E., Curns A.T., Tate J.E. Rotavirus vaccine and health care utilization for diarrhea in U.S. children. N Engl J Med. 2011 Sep 22; 365 (12): 1108−17. Doi: 10.1056/NEJMoa1000446. 24. Cortese M., Tate J., Simonsen L., Edelman L., Parashar U. Reduction in gastroenteritis in children and correlation with rotavirus vaccine uptake from a national medical claims database. 47th Annual Meeting of the Infections Diseases Society of America (IDSA), 29 October –1 November 2009. Philadelphia, PA USA. 2009. 25. Lieberman J.M., Huang X., Koski E., Kaufman H., Furlanetto R., Hurwitz H. et al. Decline in rotavirus cases in the US after licensure of a live, oral rotavirus vaccine. 48th Annual Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy (ICAAC) and 46th Annual Meeting of the Infectious Diseases Society of America (IDSA), 25–28 October 2008. Washington, DC USA. 2008. 26. Lambert S.B., Faux C.E., Hall L., Birrell F.A., Peterson K.V., Selvey C.E. et al. Early evidence for direct and indirect effects of the infant rotavirus vaccine program in Queensland. Med J Aust. 2009; 191 (3): 157−60. PMID: 19645646. 27. Anderson E. Rotavirus decreased in adults after widespread vaccination among children, IDSA 49th Annual Meeting, October 21. 2011. 28. Anderson E.J., Shippee D.B. et al. Indirect protection of adults from rotavirus by pediatric rotavirus vaccination. Clin Infect Dis. 2013; 56 (6): 755−760. 29. Vesikari T., Matson D.O., Dennehy P., van Damme P., Santosham M. et al. Safety and efficacy of a pentavalent human-bovine (WC3) reassortant rotavirus vaccine. N Engl J Med. 2006; 354: 23−33.

Информация

Данные клинические рекомендации разработаны профессиональной ассоциацией детских специалистов Союзом педиатров России и утверждены Исполкомом ассоциации на Съезде педиатров России «Актуальные проблемы педиатрии».

Рабочая группа: ФГАУ «Научно-практический центр здоровья детей» МЗ РФ (Баранов А.А., Намазова-Баранова Л.С., Таточенко В.К., Вишнёва Е.А., Федосеенко М.В., Селимзянова Л.Р), ФГБУ «НИИ детских инфекций» ФМБА (Лобзин Ю.В., Харит С.М., Бехтерева М.К.), Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова МЗ РФ (Брико Н.И., Миндлина А.Я., Кудрявцев В.В.), ФГУН «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Роспотребнадзора (Горелов А.В., Подколзин А.Т.), ФГБУ НИИ вакцин и сывороток им И.И. Мечникова (Костинов М.П.).

Непротиворечивые доказательства, основанные на хорошо выполненных РКИ или неопровержимые доказательства, представленные в какой-либо другой форме.

1В

1С

2А

Надежные доказательства, основанные на хорошо выполненных РКИ или подтвержденные другими неопровержимыми данными.

Дальнейшие исследования вряд ли изменят нашу уверенность в оценке соотношения пользы и риска.

Выбор наилучшей тактики будет зависеть от клинической ситуации (обстоятельств), пациента или социальных предпочтений.

2В

Доказательства, основанные на результатах РКИ, выполненных с существенными ограничениями (противоречивые результаты, методологические дефекты, косвенные или случайные), или сильные доказательства, представленные в какой-либо другой форме.

Дальнейшие исследования (если они проводятся), скорее всего, окажут влияние на нашу уверенность в оценке соотношения пользы и риска и могут изменить ее.

Альтернативная тактика в определенных ситуациях может явиться для некоторых пациентов лучшим выбором.

2С

Методы, использованные для анализа доказательств:

Систематические обзоры с таблицами доказательств.

Описание методов, использованных для анализа доказательств

С целью исключения влияния субъективного фактора и минимизации потенциальных ошибок каждое исследование оценивалось независимо, по меньшей мере, двумя независимыми членами рабочей группы. Какие-либо различия в оценках обсуждались всей группой в полном составе. При невозможности достижения консенсуса привлекался независимый эксперт.

Методы, использованные для формулирования рекомендаций

• Занимаясь самолечением, вы можете нанести непоправимый вред своему здоровью.
• Информация, размещенная на сайте MedElement и в мобильных приложениях "MedElement (МедЭлемент)", "Lekar Pro", "Dariger Pro", "Заболевания: справочник терапевта", не может и не должна заменять очную консультацию врача. Обязательно обращайтесь в медицинские учреждения при наличии каких-либо заболеваний или беспокоящих вас симптомов.
• Выбор лекарственных средств и их дозировки, должен быть оговорен со специалистом. Только врач может назначить нужное лекарство и его дозировку с учетом заболевания и состояния организма больного.
• Сайт MedElement и мобильные приложения "MedElement (МедЭлемент)", "Lekar Pro", "Dariger Pro", "Заболевания: справочник терапевта" являются исключительно информационно-справочными ресурсами. Информация, размещенная на данном сайте, не должна использоваться для самовольного изменения предписаний врача.
• Редакция MedElement не несет ответственности за какой-либо ущерб здоровью или материальный ущерб, возникший в результате использования данного сайта.

Ротавирусы представляют собой род семейства Reoviridae, который объединяет большое количество сходных по морфологии и антигенной структуре вирусов, вызывающих гастроэнтерит у человека, млекопитающих и птиц. Систематическое изучение ротавирусов человека началось с 1973 года, когда они были обнаружены при электронной микроскопии ультратонких срезов биоптатов слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки, полученных от больных острым гастроэнтеритом детей Австралии (Р. Бишоп и соавторы). В том же году Т. Флеветт обнаружил сходный вирус в копрофильтратах больных гастроэнтеритом методом электронной микроскопии при негативном контрастировании препаратов.

Вирусные частицы имеют диаметр от 65 до 75 нм. При проникновении контрастирующего вещества в вирион выявляется электронно-плотный центр диаметром 38 — 40 нм, который представляет собой так называемую сердцевину, окруженную электронно-прозрачным слоем. Внешний вид вирусных частиц напоминает колесо с широкой ступицей, короткими спицами и четко очерченным ободом, поэтому их стали называть ротавирусами (лат. rota — колесо).

Ротавирусы имеют две белковые оболочки — наружный и внутренний капсиды. Сердцевина содержит внутренние белки и генетический материал, представленный двунитчатой фрагментированной РНК. Геном ротавирусов человека и животных состоит из 11 фрагментов, которые могут быть разделены при электрофорезе в полиакриламидном геле (ПААГ) или агарозе. В составе ротавирусов обнаружено четыре антигена; основной из них — это групповой антиген, обусловленный белком внутреннего капсида. С учетом группоспецифических антигенов все ротавирусы делятся на пять групп: A, B, C, D, E. Ротавирусы одной группы имеют общий групповой антиген, который выявляется иммунологическими реакциями: иммуноферментный анализ, иммунофлюоресценция, иммунная электронная микроскопия и др. Большинство ротавирусов человека и животных относятся к группе A.

Источником инфекции при ротавирусном гастроэнтерите является инфицированный человек — больной манифестной формой заболевания или бессимптомно выделяющий ротавирусы с фекалиями. Вирусы в фекалиях заболевших появляются одновременно с развитием клинических симптомов, наибольшая концентрация их в кале (до 109 — 1011 вирусных частиц в 1 г) регистрируется в первые 3 — 5 дней болезни. В эти дни больные представляют наибольшую эпидемиологическую опасность для лиц, контактирующих с ними. Наиболее частым источником заболевания для детей первого года жизни являются инфицированные ротавирусом матери; для взрослых и детей более старшего возраста — дети, в основном из детских коллективов. Возможность заражения человека от животных не доказана.

Основной механизм передачи ротавирусов — фекально-оральный, осуществляемый с участием различных путей и множественных факторов передачи. Зарегистрированы водные и пищевые вспышки ротавирусной инфекции. При спорадической заболеваемости распространение ротавирусов осуществляется преимущественно контактно-бытовым путем, при этом оказываются задействованы разнообразные инфицированные вирусами предметы, окружающие источник инфекции. Особенностью эпидемического процесса при ротавирусной инфекции является зимне-весенняя сезонность, хотя спорадические заболевания регистрируются в течение всего года.

Патогенез ротавирусной инфекции характеризуется проникновением вируса в эпителиоциты слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта, преимущественно тонкой кишки, что приводит к их повреждению и отторжению от ворсинок. Вследствие этого на ворсинках тонкой кишки появляются функционально и структурно незрелые энтроциты с низкой способностью синтезировать пищеварительные ферменты. При ротавирусном гастроэнтерите это проявляется снижением уровня дисахаридаз, развивается вторичная дисахаридазная недостаточность, при которой в просвете тонкой кишки накапливаются нерасщепленные дисахариды, что создает повышенное осмотическое давление и приводит к выводу в просвет кишечника воды и электролитов из тканей организма. Это является основной причиной диареи и дегидратации и определяет основные клинические проявления болезни.

Ротавирусный гастроэнтерит как инфекционное заболевание имеет циклическое течение. Инкубационный период продолжается чаще всего от 12 — 24 часов до двух суток. Клиническая картина ротавирусного гастроэнтерита характеризуется в основном острым началом, однако в ряде случаев может иметь место продромальный период длительности от 12 до 48 — 72 часов. В этот период больные отмечают недомогание, общую слабость, повышенную утомляемость, снижение аппетита, головную боль, познабливание, урчание и неприятные ощущения в животе, умеренно выраженные катаральные явления: заложенность носа, першение в горле, легкий кашель.

В клинической картине ротавирусного гастроэнтерита в период развернутых клинических проявлений ведущими являются синдромы гастроэнтерита и интоксикации. Выраженность диареи и обусловленной ею той или иной степени дегидратации организма, а также токсикоза, продолжительность этих симптомов в значительной мере определяет тяжесть течения заболевания.

Синдром гастроэнтерита характеризуется развитием диареи, снижением аппетита, появлением урчания и болей в животе, тошноты и рвоты. Наиболее типичен для ротавирусного гастроэнтерита обильный водянистый пенистый стул желтого или желто-зеленого цвета. У больных с легким течением заболевания стул может быть кашицеобразным. Как правило, патологические примеси в стуле отсутствуют. Боль локализуется преимущественно в верхней половине живота или является диффузной, она может быть разной интенсивности. Почти всегда она сопровождается громким урчанием в животе.

Синдром интоксикации появляется в самом начале заболевания. Слабость, зачастую резкая, является наиболее частым проявлением этого синдрома; реже отмечается головная боль. При более тяжелом течении имеют место головокружение, обморочное состояние, коллапс. Обращает на себя внимание следующая особенность ротавирусного гастроэнтерита: два ведущих в клинической картине болезни синдрома развиваются в процессе заболевания не всегда однонаправленно; у некоторых больных на фоне сравнительно слабо выраженных диспепсических явлений могут наблюдаться резко выраженные симптомы общей интоксикации, особенно слабость.

Повышение температуры тела не всегда может отмечаться при ротавирусном гастроэнтерите, особенно у взрослых. У некоторых больных может быть озноб без повышения температуры. В то же время нередко в разгар заболевания выраженность лихорадочной реакции варьируется от субфебрильных цифр и выше и может достигать 38 — 39°С как у детей, так и у взрослых.

Важным в диагностическом плане для ротавирусного гастроэнтерита считается сочетание двух ведущих клинических синдромов с симптомами поражения верхних дыхательных путей. Катаральный синдром встречается приблизительно у 50% больных и проявляется в виде гиперемии и зернистости слизистых оболочек мягкого неба, небных дужек, язычка, задней стенки глотки, а также насморка, заложенности носа, кашля, болей в горле. В ряде случаев катаральные симптомы наблюдаются уже в продромальном периоде, до проявления симптомов гастроэнтерита.

В разгар болезни отмечается изменение функционального состояния сердечно-сосудистой системы, чаще у пациентов с более тяжелым течением и при наличии сопутствующих заболеваний органов кровообращения. У большинства пациентов отмечается тенденция к артериальной гипертензии, тахикардия, определяется глухость сердечных тонов при аускультации. У больных с тяжелым течением заболевания, как правило, возникают обмороки и коллапсы из-за выраженных расстройств гемоциркуляции, в генезе которых наряду с токсическими воздействиями существенное значение имеет гиповолемия. Потери жидкости и электролитов вследствие рвоты и диареи могут быть значительными и приводят к развитию дегидратации. Клинические проявления дегидратации зависят от ее степени. При легком и среднетяжелом течении ротавирусного гастроэнтерита отмечается жажда, сухость во рту, слабость, бледность (дегидратация I — II степени), при тяжелом течении наряду с этими симптомами наблюдаются также осиплость голоса, судороги мышц конечностей, акроцианоз, снижение тургора кожи, уменьшение диуреза (дегидратация III степени).

В связи с развитием при ротавирусном гастроэнтерите возможных осложнений, главным образом циркуляторных расстройств, острой сердечно-сосудистой недостаточности, нарушений гомеостаза, выделяют группы больных повышенного риска, в которые включают новорожденных, детей младшего возраста, лиц пожилого возраста, а также больных с тяжелыми сопутствующими заболеваниями. Описанные в литературе и наблюдавшиеся нами случаи ротавирусного заболевания с летальным исходом относятся именно к этим группам.

Выделяются две основные клинические формы ротавирусного заболевания — гастроэнтерическая и энтерическая. Симптомы только острого гастрита (гастритический вариант) встречаются в 3 — 10% случаев. Функциональные и морфологические нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта, возникающие при ротавирусном гастроэнтерите в случае наличия у пациентов фоновой гастроэнтерологической патологии, нередко способствуют развитию таких осложнений основного заболевания, как обострение сопутствующих болезней: хронического гастрита, энтероколита, панкреатита, часто в сочетании с выраженными явлениями дисбактериоза кишечника, требующими коррекции при лечении.

Методы диагностики ротавирусной инфекции

При ротавирусном гастроэнтерите гемограмма изменяется следующим образом: в остром периоде заболевания с высокой частотой выявляются лейкоцитоз с нейтрофилезом и повышенная СОЭ. В периоде реконвалесценции картина крови обычно нормализуется полностью. Изменения урограммы у большинства больных имеют кратковременный характер и проявляются чаще всего небольшой протеин-, лейкоцит- и эритроцитурией; в редких случаях в моче появляются гиалиновые цилиндры в незначительном количестве. При тяжелом течении заболевания нарушения функции почек могут быть более выраженными, с повышением уровня мочевины крови, олигоурией или анурией, снижением клубочковой фильтрации. На фоне проводимой терапии указанные изменения быстро исчезают и при повторных обследованиях не отмечаются.

В качестве примера, иллюстрирующего особенности клинического течения ротавирусного гастроэнтерита, приводим выписку из истории болезни.

Больная Б., 42 года. Диагноз: ротавирусный гастроэнтерит, средне-тяжелое течение. Заболела остро, заболевание началось с появления тошноты, слабости, пропал аппетит; слабость нарастала, появились сильный озноб, ломота в теле, «как при гриппе», постепенно повысилась температура — сначала 37,5°С, а затем до 38,4°С. Диарея развилась примерно через 10 часов от начала заболевания; стул жидкий, сначала кашицеобразный, затем водянистый, без патологических примесей. Боли в животе незначительные, диффузные, усиленная перистальтика, громкое урчание. Жалобы на резкую слабость, громкое урчание в животе, умеренные боли ноющего характера в животе, в области пупка; стул обильный, водянистый, желто-зеленого цвета, без патологических примесей, до 10 раз в день. При осмотре отмечены бледность кожи, гиперемия зева. Тоны сердца при аускультации приглушены, тахикардия до 36 ударов в минуту, АД 130/90 мм рт. ст. Живот мягкий, болезненный при пальпации в околопупочной области. Гемограмма на первый-второй день болезни: Hb 135 г/л, л. 8,4х109/л, п. 2%, с. 83%, л. 9%, м. 6%, СОЭ 14 мм/ч. Урограмма: относительная плотность 1,025, лейкоциты — 6—8 в поле зрения.

Лечение: обильное питье солевых растворов, парентеральная регидратационная и дезинтоксикационная терапия — трисоль 1000 мл внутривенное капельное введение, внутрь ферментные препараты: абомин, панкреатин, тансол, карболен. Течение заболевания без осложнений. На третий день болезни — субфебрильная температура, оставалась слабость; боли в животе прекратились. Стул кашицеобразный до пятого дня от начала заболевания. Полное выздоровление наступило на седьмой день болезни.

Результаты бактериологических и серологических исследований на бактерии — возбудители острых кишечных инфекций отрицательные. Диагноз ротавирусного гастроэнтерита подтвержден обнаружением ротавирусов в фекалиях на второй день болезни методом прямой электронной микроскопии и выявлением ротавирусного антигена реакцией латекс-агглютинации с использованием набора «Роталекс».

Дифференциальный диагноз у больных ротавирусным гастроэнтеритом проводят с другими острыми кишечными инфекциями как вирусной так и бактериальной этиологии, прежде всего в тех случаях, когда в клинической картине на первый план выступает синдром гастроэнтерита: с вирусными диареями различной этиологии (аденовирусы, коронавирусы, астровирусы, калицивирусы, вирус Норфолк, энтеровирусы Коксаки и ЕСНО); с гастроинтестинальной формой сальмонеллеза, с гастроэнтеритическим и гастроэнтероколитическим вариантами острой дизентерии, с пищевыми токсикоинфекциями, вызванными условно-патогенными бактериями; с холерой.

Постановка диагноза ротавирусного гастроэнтерита по клинической картине, особенно при спорадической заболеваемости, представляет определенные сложности ввиду отсутствия симптомов, строго патогномоничных для этой патологии, в связи с чем диагноз «ротавирусный гастроэнтерит» нуждается в лабораторном подтверждении. В настоящее время диагностические приемы при ротавирусной инфекции направлены на обнаружение цельных вирионов, вирусного антигена, вирусспецифической РНК в копрофильтратах, а также специфической сероконверсии (таблица). Выбор того или иного метода зависит от конкретного случая, при этом следует исходить из поставленных задач. На практике лабораторное подтверждение чаще всего основывается на обнаружении вирусного антигена в копрофильтратах с помощью реакции латекс-агглютинации (РЛА), реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) и иммуноферментного анализа (ИФА). При проведении текущей лабораторной диагностики как в стационарах, так и в амбулаторных условиях, предпочтение отдается методам РПГА и РЛА, которые доступны для практических лабораторий, просты в постановке, высокочувствительны и позволяют быстро получить результат (РЛА, по существу, является экспресс-методом, так как результат может быть получен через 10 — 15 мин). Высокой чувствительностью этих методов обусловлена возможность их применения для диагностики ротавирусного гастроэнтерита не только в ранние сроки болезни, но и позже. В случаях получения сомнительных результатов для уточнения данных целесообразно использовать более чувствительный твердофазный ИФА, который может также применяться как для текущей, так и для ретроспективной диагностики в разные сроки заболевания.

Обнаружение специфических антител и нарастание их титра в сыворотке крови больных и переболевших ротавирусным гастроэнтеритом при помощи серологических реакций с целью текущей диагностики на практике в настоящее время широкого распространения не получило и используется в основном для ретроспективного анализа различных эпидемиологических ситуаций.

Методы обнаружения вирусспецифической РНК, которые можно назвать высокочувствительными и специфичными, имеют, однако, ряд недостатков, ограничивающих их практическое применение (необходимость наличия специальной аппаратуры, реактивов, квалифицированного персонала и др.) Наиболее простой метод в этой группе — электрофорез ротавирусной РНК в полиакриламидном геле. Этот метод, позволяющий идентифицировать штаммы вирусов, вызвавшие заболевание, и дать характеристику штаммов, циркулирующих на данной территории, в основном применяется при эпидемиологических исследованиях.

В клинической практике врач нередко сталкивается с обстоятельствами (сомнительные результаты вирусологических и серологических исследований, случаи микст-инфекций), когда возникает необходимость в применении дополнительных методов для верификации диагноза. С этой целью может быть использован доступный для практического здравоохранения интрументальный метод исследования — ректороманоскопия с аспирационной биопсией слизистой оболочки толстой кишки. При гистологическом, морфометрическом и гистохимическом исследованиях биоптатов при ротавирусном гастроэнтерите выявляются характерные изменения в виде поверхностного минимально выраженного катарального колита с незначительной дистрофией эпителия (рис. 1), снижения числа серотонинсодержащих желудочно-кишечных эндокриноцитов (ЕС-клетки) в эпителиальном пласте кишечных желез, умеренной инфильтрацией собственной пластинки плазматическими клетками и увеличением в ней числа макрофагов (рис. 2). Эти особенности имеют дифференциально-диагностическое значение, поскольку отличаются указанным показателем от других острых кишечных инфекций, что может быть использовано в диагностически сложных случаях.

Здравоохранение в настоящее время не располагает препаратами, обладающими специфическим антиротавирусным действием, поэтому терапия ротавирусного гастроэнтерита является патогенетической. Основные ее цели — борьба с дегидратацией, токсикозом и связанными с ними наиболее часто встречающимися при ротавирусном гастроэнтерите нарушениями функции жизненно важных органов — сердечно-сосудистой системы и органов мочевыделения, степень выраженности которых во многом определяет тяжесть течения заболевания и его прогноз.

Для правильного выбора характера и объема проводимой регидратационной терапии в первую очередь необходимо установить степень дегидратации у того или иного пациента. При эксикозе I — II степени следует ограничиваться пероральной регидратационной терапией (препараты регидрон, глюксолан и др.). При дегидратации III степени целесообразно прибегать к комбинированной парентеральной и пероральной регидратации. Для парентеральной регидратации применяют растворы трисоль, квартасоль, ацесоль и др. С целью дезинтоксикации и улучшения гемодинамики при среднетяжелом и тяжелом течении заболевания показаны коллоидные растворы (гемодез, полиглюкин и др.).

Современными представлениями о патогенезе диарейного синдрома при ротавирусном гастроэнтерите обусловлено и назначение соответствующих средств, способствующих нормализации состояния пищеварительного тракта, а также диеты. Учитывая нарушения активности ряда пищеварительных ферментов, в частности лактазы, рекомендуется исключить в острый период заболевания из пищевого рациона больных молоко и молочные продукты. Кроме того, по этой же причине целесообразно ограничивать и пищу, богатую углеводами. В связи с вышеизложенным, в острый период необходимы энзимные препараты (панзинорм-форте, фестал и др). Кроме того, в остром периоде заболевания могут быть использованы адсорбирующие и вяжущие средства, способствующие ускоренному формированию стула (смекта, карболен и др.) также возможно применение хилака-форте. Высокой частотой дисбактериозов кишечника различной степени выраженности у больных ротавирусным гастроэнтеритом обусловлена необходимость применения в комплексной терапии бактерийных биологических препаратов. Лучшая терапевтическая эффективность при ротавирусном гастроэнтерите отмечена при применении лактосодержащих бактерийных биологических препаратов (ацилакт, лактобактерин и др.), что, по-видимому, связано с заместительным действием бактериальной лактазы, содержащейся в лактобактериях. В последние годы в комплексной терапии ротавирусного гастроэнтерита начал применяться комплексный иммуноглобулиновый препарат (КИП), который разработан и выпускается в МНИИЭМ им. Г. Н. Габричевского. Это первый отечественный иммуноглобулиновый препарат для энтерального применения. КИП характеризуется повышенной концентрацией антител к микроорганизмам, возбудителям острых кишечных инфекций, в том числе ротавирусам, сальмонеллам, шигеллам, эшерихиям и др. Применение КИП в комплексной терапии больных ротавирусным гастроэнтеритом оказывает отчетливый положительный терапевтический эффект, существенно сокращая продолжительность интоксикации и диареи, что открывает новые возможности в лечении этого заболевания.

1. Букринская А. Г., Грачева Н. М., Васильева В. И. Ротавирусная инфекция. М., 1989.
2. Дроздов С. Г., Покровский В. И., Шекоян Л. А., Машилов В. П. и др. Ротавирусный гастроэнтерит. М., 1982.
3. Новикова А. В. и др. Архив патологии, 1989, №6.
4. Щербаков И. Т. и др. Архив патологии, 2995, №3.
5. Юшук Н. Д., Царегородцев А. Д.. Лекции по инфекционным болезням. М., 1996.